Metoder til isolering af en ren kultur af patogenet. Bestemmelse af antallet af celler ved podning på faste næringsmedier (Koch-plademetoden)

Pasteur metode Koch metode Biologisk Fysisk

(har historisk (lamellær)

betydning) ledninger) Shchukevichs kemiske metode

Moderne

Såning med løkke Såning med spatel

(Drigalski-metoden)

Metoder til isolering af rene kulturer (skema 11):

1. Mekaniske frigørelsesmetoder er baseret på adskillelse af mikrober ved sekventiel gnidning af testmaterialet over overfladen af ​​en agar.

EN) Pasteurs metode– har historisk betydning, sørger for sekventiel fortynding af testmaterialet i et flydende næringsmedium ved hjælp af rullemetoden

b) Koch metode– plademetode – baseret på sekventiel fortynding af testmaterialet med kød-pepton agar, efterfulgt af hældning af reagensglas med det fortyndede materiale i petriskåle

V) Drigalski metode– ved såning af materiale rigt forurenet med mikroflora, brug 2-3 kopper til sekventiel såning med en spatel.

G) Såning med løkke i parallelle strøg.

2. Biologiske metoder baseret på patogeners biologiske egenskaber.

EN) Biologisk– infektion af meget følsomme dyr, hvor mikrober hurtigt formerer sig og ophobes. I nogle tilfælde er denne metode den eneste, der tillader isolering af en kultur af patogenet fra en syg person (for eksempel med tulariæmi), i andre tilfælde er den mere følsom (for eksempel isolering af pneumokokker i hvide mus eller det forårsagende middel af tuberkulose hos marsvin).

b) Kemisk– baseret på mykobakteriers syreresistens. For at frigøre materialet fra medfølgende flora, er det
behandlet med syreopløsning. Kun tuberkulosebaciller vil vokse, da syreresistente mikrober døde under påvirkning af syre.

V) Fysisk metode baseret på sporernes modstand mod varme. At isolere en kultur af sporedannende bakterier fra
blandinger opvarmes materialet til 80°C og inokuleres på et næringsmedium. Kun sporebakterier vil vokse, da deres sporer forblev i live og gav anledning til vækst.

G) Shchukevich metode– er baseret på den høje mobilitet af Proteus vulgaris, der er i stand til at producere krybende vækst.

Metode til gensåning fra kolonier på skrå agar og MPB:

EN) Overførsel fra kolonier til agarskråninger

Åbn låget på fadet lidt, fjern en del af en separat koloni med en calcineret, afkølet løkke, åbn et reagensglas med steril skråagar, hold det i venstre hånd i en skrå stilling, så du kan observere overfladen af medium. Overfør løkken med kulturen ind i reagensglasset uden at røre ved væggene, gnid den over næringsmediet, glid langs overfladen fra den ene kant af reagensglasset til den anden, og hæv strøgene til toppen af ​​mediet - streak seeding. Reagensglasset lukkes, og uden at give slip, underskrives navnet på den inokulerede mikrobe og datoen for podningen.

b) Overførsel fra kolonien til kød-pepton bouillon

Teknikken til gensåning på MPB er stort set den samme som ved såning på faste medier. Ved såning på MPB'en nedsænkes løkken med materialet på i mediet. Hvis materialet er tyktflydende og ikke kan fjernes fra løkken, gnides det på beholderens væg og vaskes derefter af med et flydende medium. Det flydende materiale, opsamlet med en steril Pasteur eller gradueret pipette, hældes i næringsmediet.

Som et resultat af selvstændigt arbejde skal den studerende vide:

1. Metoder til isolering af en ren kultur af mikroorganismer

2. Metoder til dyrkning af mikroorganismer

Være i stand til:

1. Færdigheder i at overholde reglerne for anti-epidemiregimet og sikkerhedsforanstaltninger

2. Desinficer materialet, desinficér hænder

3. Forbered præparater fra bakteriekolonier

4. Mikroskopikolonier

5. Gram-farve mikroorganismer

LEKTION 8

EMNE. Metoder til isolering af rene kulturer (fortsat). Enzymatisk aktivitet af bakterier og metoder til at studere det.

Hvis der på baggrund af visse symptomer på planter og resultater af mikroskopisk undersøgelse er mistanke om, at årsagen til sygdommen er en bakterie, bør næste skridt være at isolere den.

I dette tilfælde antages det, at patogenet er forurenet med ledsagende organismer, det vil sige, at der er en blandet befolkning. For at opnå patogenet i form af en separat voksende koloni, bør vævsmacerat udstryges på mediet.

Såning med et tryk. Brug en calcineret podningsløkke, tag en lille mængde plantevævsmacerat indeholdende bakterier og påfør med lette bevægelser, uden at beskadige agaroverfladen, 4-6 strøg på det forberedte næringsmedium. Efter at have genkalcineret løkken, drejes koppen med mediet 90° til højre, og derefter påføres yderligere 4-6 slag fra det andet slag, nålen kalcineres igen, og den tredje såning udføres. Herved opnås en fortynding af udgangsmaterialet, således at bakterierne efter inkubation i en termostat i 48-72 timer ved 28 °C danner individuelle kolonier af forskellige former og farver. Kolonierne overføres derefter til skrå agarrør til yderligere undersøgelse. Brug en calcineret løkke, tag en koloni og påfør den på næringsagar med en forsigtig bevægelse i form af en slange eller zigzag.

Koch hældemetode. Koch-plademetoden sikrer, at hver koloni dannes ud fra en enkelt bakteriecelle. Det er bedst at forberede en suspension fra udgangsmaterialet i sterilt vand og kun bruge Koch-metoden med denne fortynding. En lille mængde af suspensionen overføres til det første reagensglas med et næringsmedium afkølet til 60 °C. Derefter blandes indholdet af røret med inokulumet ved at rotere det mellem håndfladerne. Tag derefter et andet reagensglas, åbn det forsigtigt over brænderens flamme, og brug store løkker til at overføre tre dele af substratet ind i det fra det første reagensglas. Efter affyring af hals og prop hældes indholdet af reagensglasset i den første petriskål, hvorved låget på skålen åbnes lige nok til at indsætte reagensglassets hals under det. Umiddelbart efter hældning lukkes koppen og forsigtigt fordeles næringsmediet jævnt.

Efter at have blandet indholdet af det andet reagensglas grundigt, tag et tredje reagensglas og overfør seks portioner af substratet fra det andet ind i det med en løkke. Indholdet af reagensglasset hældes i en kop, og indholdet af reagensglasset hældes efter blanding i koppen. Skålene med mediet inkuberes i en termostat ved 28°C efter et par dage, bakterierne indeholdt i udgangsmaterialet danner kolonier.

Serieopdræt. Hvis det for eksempel er nødvendigt at isolere bakterier fra jord, så anvendes seriefortynding. Sterilt næringsmedium (15 ml pr. kop) hældes i kopper, 0,1 ml af de sidste tre fortyndinger af suspensionen påføres den hærdede agar og spredes over overfladen med en glasspatel.

For at isolere bakterier suspenderes 1 g jord i 9 ml vand, rystes godt, får lov til at bundfælde sig i et par sekunder, og seriefortyndinger fremstilles af suspensionen. Ved hjælp af denne metode kan antallet af mikroorganismer i hver prøve bestemmes.

Hvis du finder en fejl, skal du markere et stykke tekst og klikke Ctrl+Enter.

77288 0

Bakteriers kulturelle egenskaber

En koloni er en isoleret samling af celler af samme type, som voksede fra én celle (klon af celler). Afhængigt af hvor mikroorganismen vokser (på overfladen af ​​et tæt næringsmedium eller i dets tykkelse), skelnes overflade-, dybe- og bundkolonier.

Kolonier dyrket på overfladen af ​​mediet er forskellige: de er artsspecifikke, og deres undersøgelse bruges til at bestemme arten af ​​den afgrøde, der undersøges.

Når kolonier beskrives, tages der hensyn til følgende egenskaber:
1) koloniens form - rund, amøboid, rhizoid, uregelmæssig osv.;

2) størrelse (diameter) af kolonien - meget lille (spids) (0,1-0,5 mm), lille (0,5-3 mm), mellemstor (3-5 mm) og stor (mere end 5 mm i diameter);

3) koloniens overflade er glat, ru, foldet, rynket, med koncentriske cirkler eller radialt stribet;

4) koloniprofil - flad, konveks, kegleformet, kraterformet osv.;

5) gennemsigtighed - kedelig, mat, skinnende, gennemsigtig, pudderagtig;

6) koloniens farve (pigment) - farveløs eller pigmenteret (hvid, gul, gylden, rød, sort), bemærk især frigivelsen af ​​pigment i mediet med dets farve;

7) kant af kolonien - glat, bølget, takket, frynset osv.;

8) kolonistruktur - homogen, fin- eller grovkornet, stribet; kanten og strukturen af ​​kolonien bestemmes ved hjælp af et forstørrelsesglas eller ved lav forstørrelse af et mikroskop ved at placere en petriskål med podningen på mikroskopbordet med låget nedad;

9) koloniens konsistens; bestemmes ved at røre overfladen med en løkke: kolonien kan være tæt, blød, vokse til agar, slim (strækker sig bag løkken), skrøbelig (brydes let, når den er i kontakt med løkken).

Dybe kolonier ligner oftest mere eller mindre fladtrykte linser (oval form med spidse ender), nogle gange bomuldsklumper med trådlignende udvækster ind i næringsmediet. Dannelsen af ​​dybe kolonier er ofte ledsaget af brud på det tætte medium, hvis mikroorganismer frigiver gas.

Bundkolonier ser normalt ud som tynde gennemsigtige film, der spreder sig langs bunden.

Koloniens egenskaber kan ændre sig med alderen, de afhænger af mediets sammensætning og dyrkningstemperaturen.

Væksten af ​​mikroorganismer på flydende næringsmedier tages i betragtning ved brug af fire- til syv-dages kulturer dyrket under stationære forhold.

I flydende næringsmedier, med vækst af mikroorganismer, observeres uklarhed af mediet og dannelse af en film eller sediment.

Ved dyrkning på semi-flydende (0,5-0,7% agar) næringsmedier forårsager mobile mikrober udtalt turbiditet, immobile former vokser kun under såning ved injektion i mediet.

Ofte er væksten af ​​mikrober ledsaget af udseendet af lugt, pigmentering af miljøet og frigivelse af gas. Den karakteristiske lugt af kulturer af nogle typer bakterier er forbundet med dannelsen af ​​forskellige estere (ethylacetat, amylacetat, etc.), indol, mercaptan, hydrogensulfid, skatol, ammoniak, smørsyre.

Evnen til at danne pigmenter er iboende i mange typer mikroorganismer. Pigmenternes kemiske natur er forskelligartet: carotenoider, anthocyaniner, melaniner. Hvis pigmentet er uopløseligt i vand, farves kun kulturplakken; hvis det er opløseligt, bliver næringsmediet også farvet. Det menes, at pigmenter beskytter bakterier mod de skadelige virkninger af sollys, hvilket er grunden til, at der er så mange pigmenterede bakterier i luften, derudover er pigmenter involveret i metabolismen af ​​disse mikroorganismer.

I naturen findes såkaldte fosforescerende bakterier, hvor kulturer lyser i mørke med et grønligt-blåligt eller gulligt lys. Sådanne bakterier findes hovedsageligt i flod- eller havvand. Lysende bakterier - fotobakterier - omfatter aerobe bakterier (vibrios, kokker, stænger).

Isolering af rene kulturer af mikroorganismer

Materialet, der undersøges (vand, jord, luft, mad eller andre genstande) indeholder normalt associationer af mikrober.

Isolering af en ren kultur gør det muligt at studere de morfologiske, kulturelle, biokemiske, antigene og andre egenskaber, hvis helhed bestemmer arten og typen af ​​patogenet, dvs. dets identifikation er foretaget.

For at isolere rene kulturer af mikroorganismer anvendes metoder, der kan opdeles i flere grupper:
1. Pasteurs metode - sekventiel fortynding af testmaterialet i et flydende næringsmedium til koncentrationen af ​​én celle i volumenet (har historisk betydning).

2. Koch-metode (“pladeledninger”) - sekventiel fortynding af testmaterialet i smeltet agar (temperatur 48-50 C), efterfulgt af hældning i petriskåle, hvor agaren størkner. Podninger laves som regel ud fra de sidste tre eller fire fortyndinger, hvor bakterier bliver få og senere, efterhånden som de vokser på petriskåle, opstår der isolerede kolonier, dannet af én indledende modercelle. Fra isolerede kolonier dybt inde i agaren opnås en ren bakteriekultur ved subkultur på friske medier.

3. Shukevich metode - bruges til at opnå en ren kultur af Proteus og andre mikroorganismer med "krybende" vækst. Testmaterialet inokuleres i kondensvand i bunden af ​​agarskråningen. Mobile mikrober (Proteus) er i stand til at stige op ad den skrå agar, immobile former forbliver til at vokse nedenunder, på stedet for såning. Ved at efterså de øvre kanter af kulturen, kan man opnå en ren kultur.

4. Drigalsky-metoden - udbredt i bakteriologisk praksis, hvor materialet, der undersøges, fortyndes i et reagensglas med steril saltvandsopløsning eller bouillon. En dråbe af materialet tilsættes den første kop og spredes ud over mediets overflade med en steril glasspatel. Derefter, med den samme spatel (uden at brænde den i brænderens flamme), udføres den samme såning i den anden og tredje kop.

Ved hver inokulering af bakterier bliver der mindre og mindre tilbage på spatelen, og ved såning på den tredje kop vil bakterierne blive fordelt over overfladen af ​​næringsmediet adskilt fra hinanden. Efter 1-7 dages opbevaring af skålene i en termostat (afhængigt af væksthastigheden af ​​mikroorganismer), på den tredje skål, producerer hver bakterie en klon af celler, der danner en isoleret koloni, som subkultiveres på skrå agar for at akkumulere en ren kultur.

5. Weinberg metode. Særlige vanskeligheder opstår ved isolering af rene kulturer af obligatoriske anaerober. Hvis kontakt med molekylær oxygen ikke umiddelbart forårsager celledød, så udføres podning efter Drigalsky-metoden, men herefter placeres skålene straks i en anaerostat. Avlsmetoden bruges dog oftere. Dens essens ligger i det faktum, at fortyndingen af ​​det undersøgte materiale udføres i et smeltet og afkølet til 45-50 oC agarnæringsmedium.

Der laves 6-10 successive fortyndinger, derefter afkøles mediet i reagensglassene hurtigt, og overfladen dækkes med et lag af en blanding af paraffin og vaseline for at forhindre luft i at trænge ind i næringsmediets tykkelse. Nogle gange overføres næringsmediet efter såning og blanding til sterile Burri-rør eller kapillære Pasteur-pipetter, hvis ender er forseglet. Med vellykket fortynding vokser isolerede kolonier af anaerobe i reagensglas, Burri-rør og Pasteur-pipetter. For at sikre, at isolerede kolonier er tydeligt synlige, anvendes klarede næringsmedier.

For at udvinde isolerede kolonier af anaerober opvarmes røret let ved at dreje det over en flamme, mens agaren, der støder op til væggene, smelter, og indholdet af røret i form af en agarsøjle glider ud i en steril petriskål. Agarsøjlen skæres over med en steril pincet, og kolonierne fjernes med en løkke. De ekstraherede kolonier placeres i et flydende medium, der er gunstigt for udvikling af isolerede mikroorganismer. Agarmediet blæses ud af Burri-røret ved at lede gassen gennem en bomuldsprop.

6. Hungate-metoden. Når de ønsker at opnå isolerede kolonier af bakterier med særlig høj følsomhed over for ilt (strenge aerobe), bruges Hungate roterende rør-metoden. For at gøre dette inokuleres det smeltede agarmedium med bakterier ved en konstant strøm gennem et reagensglas med inert gas, der er befriet for ilturenheder. Røret forsegles derefter med en gummiprop og placeres vandret i en klemme, der roterer røret; mediet fordeles jævnt over reagensglassets vægge og størkner til et tyndt lag. Brugen af ​​et tyndt lag i et reagensglas fyldt med en gasblanding giver mulighed for at opnå isolerede kolonier, der er tydeligt synlige for det blotte øje.

7. Isolering af individuelle celler ved hjælp af en mikromanipulator. En mikromanipulator er en enhed, der giver dig mulighed for at fjerne en celle fra en suspension ved hjælp af en speciel mikropipette eller mikroloop. Denne operation styres under et mikroskop. Et fugtigt kammer er installeret på mikroskopbordet, hvori det hængende dråbepræparat placeres. Mikropipetter (mikropoops) er fastgjort i holderne til operationsstandere, hvis bevægelse i mikroskopets synsfelt udføres med mikronpræcision takket være et system af skruer og håndtag. Forskeren ser gennem et mikroskop og fjerner individuelle celler med mikropipetter og overfører dem til rør indeholdende et sterilt flydende medium for at opnå en celleklon.

L.V. Timoschenko, M.V. Chubik

Særlige miljøer.

Inden for bakteriologien anvendes industrielt fremstillede tørre næringsmedier i vid udstrækning, som er hygroskopiske pulvere, der indeholder alle mediets komponenter undtagen vand. Til deres tilberedning anvendes tryptiske fordøjelser af billige non-food produkter (fiskeaffald, kød- og benmel, teknisk kasein). De er bekvemme til transport, kan opbevares i lang tid, aflaster laboratorier fra den enorme proces med at forberede medier og bringer dem tættere på at løse problemet med mediestandardisering. Den medicinske industri producerer tørre medier Endo, Levin, Ploskirev, vismutsulfitagar, næringsagar, kulhydrater med BP-indikator og andre.

Termostater

Termostater bruges til at dyrke mikroorganismer.

En termostat er en enhed, der holder en konstant temperatur. Enheden består af et varmelegeme, kammer, dobbeltvægge, mellem hvilke luft eller vand cirkulerer. Temperaturen reguleres af en termostat. Den optimale temperatur for reproduktion af de fleste mikroorganismer er 37°C.

LEKTION 7

EMNE: METODER TIL AT ISOLERE REN KULTUR AF AEROBES. TRIN TIL ISOLERING AF REN KULTUR AF AEROBISKE BAKTERIER VED MEKANISK DISSOCIATIONSMETODE

Lektionsplan

1. Begrebet "ren kultur" af bakterier

2. Metoder til isolering af rene kulturer ved mekanisk adskillelse

3. Biologiske metoder til isolering af renkulturer

4. Metoder til identifikation af bakterier

Formålet med lektionen: At gøre eleverne bekendt med forskellige metoder til at isolere renkulturer, at lære at så med en løkke, strøg og en injektion

Retningslinjer for demonstrationen

I deres naturlige habitat findes bakterier i associationer. For at bestemme mikrobernes egenskaber og deres rolle i udviklingen af ​​den patologiske proces er det nødvendigt at have bakterier i form af homogene populationer (rene kulturer). En ren kultur er en samling af bakterielle individer af samme art dyrket på et næringsmedium.

Metoder til isolering af rene kulturer af aerobe bakterier

Pasteur metode Koch metode Biologisk Fysisk

(har historisk (pladeledninger)

Betyder)

Kemisk metode

Shchukevich

Moderne

Såning med løkke Såning med spatel

(Drigalski-metoden)

Metoder til isolering af rene kulturer:

1. Mekaniske adskillelsesmetoder er baseret på adskillelse af mikrober ved sekventiel gnidning af testmaterialet over overfladen af ​​agaren.

a) Pasteurs metode - har historisk betydning, giver mulighed for sekventiel fortynding af testmaterialet i et flydende næringsmedium ved rullemetoden

b) Kochs metode - plademetoden - er baseret på den sekventielle fortynding af testmaterialet med kødpeptonagar, efterfulgt af hældning af reagensglas med det fortyndede materiale i petriskåle.

c) Drigalsky-metoden - ved såning af materiale rigt frøet med mikroflora, brug 2-3 kopper til sekventiel såning med en spatel.

d) Såning med løkke i parallelle træk.

2. Biologiske metoder er baseret på patogeners biologiske egenskaber.

a) Biologisk - infektion af meget følsomme dyr, hvor mikrober hurtigt formerer sig og akkumuleres. I nogle tilfælde er denne metode den eneste, der gør det muligt at isolere patogenkulturen fra en syg person (f.eks. med tulariæmi), i andre tilfælde er den mere følsom (f.eks. isolering af pneumokokker i hvide mus eller patogen af ​​tuberkulose hos marsvin).

b) Kemisk – baseret på syreresistens hos mykobakterier. For at frigøre materialet fra medfølgende flora, er det
behandlet med syreopløsning. Kun tuberkulosebaciller vil vokse, da syreresistente mikrober døde under påvirkning af syre.

c) Den fysiske metode er baseret på sporers modstandsdygtighed over for varme. At isolere en kultur af sporedannende bakterier fra
blandinger opvarmes materialet til 80°C og inokuleres på et næringsmedium. Kun sporebakterier vil vokse, da deres sporer forblev i live og gav anledning til vækst.

d) Shchukevichs metode - baseret på den høje mobilitet af Proteus vulgaris, i stand til at producere krybende vækst.

Fremgangsmåde til fremstilling af pladeagar

MPA smeltes i et vandbad og afkøles derefter til 50-55°C. Flaskehalsen brændes i flammen fra en spritlampe, petriskålene åbnes, så flaskehalsen passer ind uden at røre fadets kanter, 10-15 ml MPA hældes i, låget er lukkes, rystes fadet, så mediet er jævnt fordelt, og efterlades på en vandret overflade, indtil det stivner. Efter tørring opbevares pladeagarplader koldt.

Løkkesåning

Brug en steril afkølet løkke, tag en dråbe materiale, åbn den ene kant af koppen med din venstre hånd, bring løkken indeni og lav et par strøg på ét sted med en løkke i den modsatte kant, og riv derefter løkken af ​​og inokuler materialet i parallelle strøg fra den ene kant af koppen til den anden med et interval på 5-6 mm. I begyndelsen af ​​såningen, når der er mange mikrober på løkken, vil de give sammenflydende vækst, men for hvert slag er der færre og færre mikrober på løkken, og de vil forblive solitære og producere isolerede kolonier.

Såning efter Drigalsky-metoden

Denne metode bruges ved inokulering af materiale stærkt forurenet med mikroflora (pus, afføring, sputum). For at så ved hjælp af Drigalsky-metoden skal du tage en spatel og flere kopper (3-4). En spatel er et værktøj lavet af metaltråd eller glaspil, bøjet til en trekant eller L-form. Materialet indføres i den første kop med en løkke eller pipette og fordeles jævnt med en spatel over overfladen af ​​mediet med den samme spatel, uden at brænde den, gnides materialet ind i næringsmediet i den anden kop, og derefter; i den tredje. Med sådan såning vil den første kop have sammenflydende vækst, og isolerede kolonier vil vokse i efterfølgende kopper.

Hovedstadier i udviklingen af ​​mikrobiologi, virologi og immunologi

Disse omfatter følgende:

1.Empirisk viden(før opfindelsen af ​​mikroskoper og deres anvendelse til at studere mikroverdenen).

J. Fracastoro (1546) foreslog den levende natur af midler til infektionssygdomme - contagium vivum.

2.Morfologisk periode tog omkring to hundrede år.

Antonie van Leeuwenhoek i 1675 først beskrev protozoer, i 1683 - de vigtigste former for bakterier. Ufuldkommenheden af ​​instrumenter (den maksimale forstørrelse af X300-mikroskoper) og metoder til at studere mikroverdenen bidrog ikke til den hurtige ophobning af videnskabelig viden om mikroorganismer.

3.Fysiologisk periode(siden 1875) - L. Pasteurs og R. Kochs æra.

L. Pasteur - undersøgelse af det mikrobiologiske grundlag for fermenterings- og henfaldsprocesser, udvikling af industriel mikrobiologi, belysning af mikroorganismers rolle i cirkulationen af ​​stoffer i naturen, opdagelse anaerob mikroorganismer, udvikling af principper asepsis, metoder sterilisering, svækkelse ( dæmpning)virulens og modtager vacciner (vaccinestammer).

R. Koch - isolationsmetode rene kulturer på faste næringsmedier, metoder til farvning af bakterier med anilinfarvestoffer, opdagelse af årsagerne til miltbrand, kolera ( Koch komma), tuberkulose (Koch stikker), forbedring af mikroskopiteknikker. Eksperimentel underbygning af Henle-kriterierne, kendt som Henle-Koch-postulater (triade).

4.Immunologisk periode.

I.I. Mechnikov er "mikrobiologiens digter" ifølge Emil Roux' figurative definition. Han skabte en ny æra i mikrobiologi - læren om immunitet (immunitet), udvikle teorien om fagocytose og underbygge den cellulære teori om immunitet.

Samtidig blev data om produktionen i kroppen akkumuleret antistoffer mod bakterier og deres toksiner, hvilket gjorde det muligt for P. Ehrlich at udvikle den humorale teori om immunitet. I den efterfølgende langsigtede og frugtbare diskussion mellem tilhængere af de fagocytiske og humorale teorier blev mange mekanismer for immunitet afsløret, og videnskaben blev født immunologi.

Det blev senere fundet, at arvelig og erhvervet immunitet afhænger af den koordinerede aktivitet af fem hovedsystemer: makrofager, komplement, T- og B-lymfocytter, interferoner, det vigtigste histokompatibilitetssystem, som giver forskellige former for immunrespons. I.I. Mechnikov og P. Erlich i 1908. blev nobelprisen uddelt.

12. februar 1892 På et møde i det russiske videnskabsakademi rapporterede D.I. Ivanovsky, at det forårsagende middel til tobaksmosaiksygdom er en filtrerbar virus. Denne dato kan betragtes som en fødselsdag virologi, og D.I. Ivanovsky er dens grundlægger. Efterfølgende viste det sig, at virus forårsager sygdomme ikke kun hos planter, men også hos mennesker, dyr og endda bakterier. Men først efter at genets natur og den genetiske kode var etableret, blev vira klassificeret som levende natur.

5. Det næste vigtige trin i udviklingen af ​​mikrobiologi var opdagelse af antibiotika. I 1929 A. Fleming opdagede penicillin, og antibiotikabehandlingens æra begyndte, hvilket førte til revolutionerende fremskridt inden for medicin. Senere viste det sig, at mikrober tilpasser sig antibiotika, og undersøgelsen af ​​mekanismerne for lægemiddelresistens førte til opdagelsen af ​​en anden ekstrakromosomalt (plasmid) genom bakterie.

Studerer plasmider viste, at de er endnu mere simpelt strukturerede organismer end vira, og i modsætning til bakteriofager skader ikke bakterier, men giver dem yderligere biologiske egenskaber. Opdagelsen af ​​plasmider har betydeligt udvidet forståelsen af ​​livsformerne og mulige veje for dets udvikling.

6. Moderne molekylær genetisk fase Udviklingen af ​​mikrobiologi, virologi og immunologi begyndte i anden halvdel af det 20. århundrede i forbindelse med genetikens og molekylærbiologiens resultater og oprettelsen af ​​elektronmikroskopet.

Eksperimenter med bakterier har bevist DNA's rolle i overførslen af ​​arvelige egenskaber. Brugen af ​​bakterier, vira og senere plasmider som objekter for molekylærbiologi og genetisk forskning har ført til en dybere forståelse af de grundlæggende processer, der ligger til grund for livet. Afklaring af principperne for kodning af genetisk information i bakterielt DNA og etablering af universaliteten af ​​den genetiske kode gjorde det muligt bedre at forstå de molekylærgenetiske mønstre, der er karakteristiske for mere højt organiserede organismer.

Afkodning af genomet af Escherichia coli har gjort det muligt at designe og transplantere gener. Nu Genteknologi skabt nye retninger bioteknologi.

Den molekylærgenetiske organisation af mange vira og mekanismerne for deres interaktion med celler er blevet dechifreret, viralt DNA's evne til at integreres i genomet af en følsom celle og de grundlæggende mekanismer for viral carcinogenese er blevet etableret.

Immunologi har gennemgået en ægte revolution, der går langt ud over omfanget af infektiøs immunologi og er blevet en af ​​de vigtigste grundlæggende medicinske og biologiske discipliner. Til dato er immunologi en videnskab, der ikke kun studerer beskyttelse mod infektioner. I moderne forstand Immunologi er en videnskab, der studerer mekanismerne for selvforsvar af kroppen fra alt genetisk fremmed, der opretholder kroppens strukturelle og funktionelle integritet.

Immunologi omfatter i øjeblikket en række specialiserede områder, blandt hvilke, sammen med infektiøs immunologi, de vigtigste omfatter immunogenetik, immunomorfologi, transplantationsimmunologi, immunopatologi, immunhæmatologi, oncoimmunologi, ontogenese-immunologi, vaccinologi og anvendt immundiagnostik.

Mikrobiologi og virologi som grundlæggende biologiske videnskaber omfatter også en række uafhængige videnskabelige discipliner med deres egne mål og målsætninger: generelle, tekniske (industrielle), landbrugs-, veterinær- og dem af størst betydning for menneskeheden medicinsk mikrobiologi og virologi.

Medicinsk mikrobiologi og virologi studerer årsagerne til menneskelige infektionssygdomme (deres morfologi, fysiologi, økologi, biologiske og genetiske egenskaber), udvikler metoder til deres dyrkning og identifikation, specifikke metoder til deres diagnose, behandling og forebyggelse.