Patogenin təmiz mədəniyyətini təcrid etmək üsulları. Bərk qida mühitinə toxum əkməklə hüceyrələrin sayının təyini (Koch boşqab üsulu)

Paster üsulu Kox metodu Bioloji Fiziki

(tarixi var (lamel)

mənası) məftillər) Shchukeviçin kimyəvi üsulu

Müasir

Döngə ilə əkin Bir spatula ilə əkin

(Driqalski üsulu)

Təmiz kulturaların təcrid edilməsi üsulları (Sxem 11):

1. Mexanik boşalma üsulları test materialının aqarın səthinə ardıcıl sürtülməsi yolu ilə mikrobların ayrılmasına əsaslanır.

A) Paster üsulu– tarixi əhəmiyyətə malikdir, yuvarlanma üsulu ilə sınaq materialının maye qida mühitində ardıcıl seyreltilməsini təmin edir.

b) Koch üsulu– boşqab üsulu – sınaq materialının ət-pepton agarı ilə ardıcıl seyreltilməsi, ardınca seyreltilmiş material ilə sınaq borularının Petri qablarına tökülməsinə əsaslanır.

V) Driqalski üsulu– mikroflorası ilə çox çirklənmiş materialı səpərkən, şpatula ilə ardıcıl səpmək üçün 2-3 stəkan istifadə edin.

G) Paralel vuruşlarda bir döngə ilə əkin.

2. Bioloji üsullar patogenlərin bioloji xüsusiyyətlərinə əsaslanır.

A) Bioloji– mikrobların sürətlə çoxaldığı və toplandığı yüksək həssas heyvanların infeksiyası. Bəzi hallarda, bu üsul xəstə bir insandan patogen mədəniyyətini təcrid etməyə imkan verən yeganə üsuldur (məsələn, tulyaremiya ilə), digər hallarda daha həssasdır (məsələn, ağ siçanlarda pnevmokok və ya törədicinin təcrid edilməsi). Qvineya donuzlarında vərəm).

b) Kimyəvi– mikobakteriyaların turşu müqavimətinə əsaslanır. Materialı müşayiət edən floradan azad etmək üçün
turşu məhlulu ilə müalicə olunur. Yalnız vərəm çöpləri böyüyəcək, çünki turşuya davamlı mikroblar turşunun təsiri altında ölür.

V) Fiziki üsul sporların istiliyə davamlılığına əsaslanır. Spora yaradan bakteriyaların kulturasını təcrid etmək
qarışıqlar, material 80°C-də qızdırılır və qidalı mühitə aşılanır. Yalnız spor bakteriyaları böyüyəcək, çünki onların sporları canlı qaldı və böyüməyə səbəb oldu.

G) Şukeviç üsulu– sürünən böyüməyə qadir olan Proteus vulgarisin yüksək hərəkətliliyinə əsaslanır.

Koloniyalardan maili ağar və MPB üzərində təkrar əkmə üsulu:

A) Koloniyalardan ağar mailliyinə köçürülür

Qabın qapağını yüngülcə açın, ayrıca koloniyanın bir hissəsini kalsine edilmiş, soyudulmuş ilmə ilə çıxarın, steril maili agar ilə sınaq borusunu açın, onu sol əlinizdə maili vəziyyətdə saxlayın ki, qabın səthini müşahidə edə biləsiniz. orta. Kultura ilə döngəni divarlarına toxunmadan sınaq borusuna köçürün, qidalı mühitin üzərindən sürtün, səthi boyunca sınaq borusunun bir kənarından digərinə sürüşdürün, vuruşları mühitin yuxarısına qaldırın - zolaq toxumu. Sınaq borusu bağlanır və buraxmadan peyvənd edilmiş mikrobun adı və peyvənd tarixi imzalanır.

b) Koloniyadan ət-pepton bulyonuna köçürülməsi

MPB-də təkrar əkmə texnikası, əsasən, bərk mühitdə əkin zamanı olduğu kimidir. MPB-də əkin edərkən, üzərində material olan ilgək mühitə batırılır. Material viskozdursa və döngədən çıxarıla bilmirsə, gəminin divarına sürtülür və sonra maye mühitlə yuyulur. Steril Pasteur və ya gradasiyalı pipetlə toplanmış maye material qida mühitinə tökülür.

Müstəqil iş nəticəsində tələbə bilməlidir:

1. Mikroorqanizmlərin təmiz kulturasının ayrılması üsulları

2. Mikroorqanizmlərin becərilməsi üsulları

Bacarmaq:

1. Epidemiya əleyhinə rejim qaydalarına və təhlükəsizlik tədbirlərinə riayət etmək bacarıqları

2. Materialı dezinfeksiya edin, əlləri dezinfeksiya edin

3. Bakteriya koloniyalarından preparatlar hazırlayın

4. Mikroskopiya koloniyaları

5. Qram boyama mikroorqanizmləri

DƏRS 8

MÖVZU. Təmiz kulturaların ayrılması üsulları (davamı). Bakteriyaların fermentativ fəaliyyəti və onun öyrənilməsi üsulları.

Bitkilərdəki müəyyən əlamətlərə və mikroskopik müayinənin nəticələrinə əsasən xəstəliyin törədicisinin bakteriya olduğuna şübhə yaranarsa, növbəti addım onun təcrid edilməsi olmalıdır.

Bu vəziyyətdə, patogenin müşayiət olunan orqanizmlərlə çirkləndiyi, yəni qarışıq populyasiyanın olduğu güman edilir. Ayrı-ayrı böyüyən koloniya şəklində patogen əldə etmək üçün mühitin üzərinə toxuma maceratını zolaqlamaq lazımdır.

Bir toxunuşla əkin. Kalsine edilmiş peyvənd dövrəsindən istifadə edərək, tərkibində bakteriya olan bitki toxuması maceratından az miqdarda götürün və yüngül hərəkətlərlə, agar səthini zədələmədən, hazırlanmış qida mühitinə 4-6 vuruş tətbiq edin. Döngəni yenidən kalsifikasiya etdikdən sonra, mühiti olan fincan 90° sağa çevrilir və sonra ikinci vuruşdan daha 4-6 vuruş vurulur, iynə yenidən kalsine edilir və üçüncü səpin aparılır. Bu, başlanğıc materialın elə seyreltilməsinə nail olur ki, bakteriyalar termostatda 48-72 saat ərzində 28 °C-də inkubasiya edildikdən sonra müxtəlif formalı və rəngli fərdi koloniyalar əmələ gətirir. Sonra koloniyalar əlavə müayinə üçün agar maili borulara köçürülür. Kalsine edilmiş bir döngədən istifadə edərək, bir koloniya götürün və ilan və ya ziqzaq şəklində diqqətli bir hərəkətlə qidalı agara tətbiq edin.

Koch tökmə üsulu. Koch boşqab üsulu hər koloniyanın tək bir bakteriya hüceyrəsindən əmələ gəlməsini təmin edir. Steril suda başlanğıc materialdan süspansiyon hazırlamaq və yalnız bu seyreltmə ilə Koch metodundan istifadə etmək yaxşıdır. Süspansiyonun kiçik bir hissəsi 60 ° C-ə qədər soyudulmuş qida mühiti ilə birinci sınaq borusuna köçürülür. Sonra tüpün içindəkilər ovuclar arasında fırlanaraq inokulumla qarışdırılır. Sonra ikinci sınaq borusu götürün, onu odlu alov üzərində diqqətlə açın və birinci sınaq borusundan substratın üç hissəsini ona köçürmək üçün böyük ilmələrdən istifadə edin. Boyun və tıxac yandırıldıqdan sonra sınaq borusunun içindəkilər birinci Petri qabına tökülür, qabın qapağı kifayət qədər açılır ki, sınaq borusunun boynunu onun altına salsın. Töküldükdən dərhal sonra kuboku bağlayın və qidalı mühiti diqqətlə bərabər paylayın.

İkinci sınaq borusunun tərkibini yaxşıca qarışdırdıqdan sonra üçüncü bir sınaq borusunu götürün və substratın altı hissəsini ikincidən ona bir döngə ilə köçürün. Sınaq borusunun içindəkilər stəkana tökülür və sınaq borusunun içindəkilər qarışdırıldıqdan sonra kuboka tökülür. Mühit olan qablar termostatda 28°C-də inkubasiya edilir, bir neçə gündən sonra başlanğıc materialın tərkibində olan bakteriyalar koloniyalar əmələ gətirir.

Serial yetişdirmə. Məsələn, bakteriyaları torpaqdan təcrid etmək lazımdırsa, ardıcıl seyreltmə istifadə olunur. Steril qida mühiti (hər stəkan 15 ml) stəkanlara tökülür, 0,1 ml suspenziyanın son üç qatılaşması bərkimiş agara vurulur və şüşə spatula ilə səthə yayılır.

Bakteriyaları təcrid etmək üçün 1 q torpaq 9 ml suda dayandırılır, yaxşıca çalxalanır, bir neçə saniyə dayanmasına icazə verilir və süspansiyondan ardıcıl seyreltmələr hazırlanır. Bu üsuldan istifadə etməklə hər bir nümunədə mikroorqanizmlərin sayını təyin etmək olar.

Səhv tapsanız, lütfən, mətnin bir hissəsini vurğulayın və klikləyin Ctrl+Enter.

77288 0

Bakteriyaların mədəni xüsusiyyətləri

Koloniya bir hüceyrədən (hüceyrə klonu) böyüyən eyni tipli hüceyrələrin təcrid olunmuş toplusudur. Mikroorqanizmin böyüdüyü yerdən (sıx qidalı mühitin səthində və ya qalınlığından) asılı olaraq səth, dərin və dib koloniyaları fərqləndirilir.

Mühitin səthində yetişdirilən koloniyalar müxtəlifdir: onlar növlərə xasdır və onların öyrənilməsi tədqiq olunan məhsulun növlərini müəyyən etmək üçün istifadə olunur.

Koloniyaları təsvir edərkən aşağıdakı xüsusiyyətlər nəzərə alınır:
1) koloniyanın forması - dairəvi, amoeboid, rizoid, nizamsız və s.;

2) koloniyanın ölçüsü (diametri) - çox kiçik (uclu) (0,1-0,5 mm), kiçik (0,5-3 mm), orta ölçülü (3-5 mm) və böyük (diametri 5 mm-dən çox);

3) koloniyanın səthi hamar, kobud, qatlanmış, qırışmış, konsentrik dairələrlə və ya radial zolaqlıdır;

4) koloniya profili - yastı, qabarıq, konusşəkilli, kraterşəkilli və s.;

5) şəffaflıq - tutqun, tutqun, parlaq, şəffaf, pudralı;

6) koloniyanın rəngi (piqment) - rəngsiz və ya piqmentli (ağ, sarı, qızılı, qırmızı, qara), xüsusilə rəngləmə ilə mühitə piqmentin buraxılmasını qeyd edin;

7) koloniyanın kənarı - hamar, dalğalı, kələ-kötür, saçaqlı və s.;

8) koloniya quruluşu - bircinsli, incə və ya qaba dənəli, zolaqlı; koloniyanın kənarı və quruluşu böyüdücü şüşədən istifadə edilməklə və ya mikroskopun aşağı böyüdülməsində peyvəndi olan Petri qabını qapağı aşağı vəziyyətdə mikroskop masasına qoymaqla müəyyən edilir;

9) koloniyanın konsistensiyası; səthə ilgəklə toxunmaqla müəyyən edilir: koloniya sıx, yumşaq, agara çevrilə bilər, selikli (ilgənin arxasında uzanır), kövrək (ilgə ilə təmasda olduqda asanlıqla qırılır).

Dərin koloniyalar çox vaxt daha çox və ya daha az yastılaşmış mərciməyə (uclu ucları olan oval forma), bəzən qida mühitinə sap kimi çıxıntıları olan pambıq yununa bənzəyir. Dərin koloniyaların əmələ gəlməsi, mikroorqanizmlər qaz buraxdıqda, sıx mühitin qırılması ilə tez-tez müşayiət olunur.

Alt koloniyalar adətən dib boyunca yayılan nazik şəffaf filmlərə bənzəyir.

Koloniyanın xüsusiyyətləri yaşla dəyişə bilər, onlar mühitin tərkibindən və becərmə temperaturundan asılıdır.

Maye qida mühitində mikroorqanizmlərin böyüməsi stasionar şəraitdə yetişdirilən dörd-yeddi günlük kulturalardan istifadə etməklə nəzərə alınır.

Maye qida mühitində mikroorqanizmlərin böyüməsi ilə mühitin bulanıqlığı və bir filmin və ya çöküntünün əmələ gəlməsi müşahidə olunur.

Yarımmaye (0,5-0,7% agar) qida mühitində böyüdükdə mobil mikroblar açıq bulanıqlığa səbəb olur, hərəkətsiz formalar yalnız mühitə inyeksiya yolu ilə əkin zamanı böyüyür.

Tez-tez mikrobların böyüməsi qoxunun görünüşü, ətraf mühitin piqmentasiyası və qazın sərbəst buraxılması ilə müşayiət olunur. Bəzi bakteriyalar növlərinin kulturalarının xarakterik qoxusu müxtəlif efirlərin (etil asetat, amil asetat və s.), indol, merkaptan, hidrogen sulfid, skatol, ammonyak, butir turşusunun əmələ gəlməsi ilə əlaqələndirilir.

Piqmentlər yaratmaq qabiliyyəti bir çox mikroorqanizm növünə xasdır. Piqmentlərin kimyəvi təbiəti müxtəlifdir: karotenoidlər, antosiyaninlər, melaninlər. Piqment suda həll olunmursa, yalnız mədəni lövhə ləkələnir; həll olunarsa, qidalı mühit də rənglənir. Piqmentlərin bakteriyaları günəş işığının zərərli təsirlərindən qoruduğuna inanılır, buna görə də havada çoxlu piqmentli bakteriyalar var, bundan əlavə, piqmentlər bu mikroorqanizmlərin metabolizmində iştirak edir.

Təbiətdə fosforlu bakteriyalar var, onların mədəniyyətləri qaranlıqda yaşılımtıl-mavi və ya sarımtıl işıqla parlayır. Belə bakteriyalara əsasən çay və ya dəniz sularında rast gəlinir. Parlaq bakteriyalara - fotobakteriyalara aerob bakteriyalar (vibrionlar, kokklar, çubuqlar) daxildir.

Mikroorqanizmlərin təmiz kulturalarının ayrılması

Tədqiq olunan material (su, torpaq, hava, qida və ya digər obyektlər) adətən mikrobların birləşmələrini ehtiva edir.

Təmiz bir mədəniyyətin təcrid edilməsi morfoloji, mədəni, biokimyəvi, antigenik və digər xüsusiyyətləri öyrənməyə imkan verir, onların məcmusu patogenin növünü və növünü müəyyən edir, yəni onun identifikasiyası aparılır.

Mikroorqanizmlərin təmiz mədəniyyətlərini təcrid etmək üçün bir neçə qrupa bölünə bilən üsullardan istifadə olunur:
1. Paster üsulu - maye qidalı mühitdə sınaq materialının həcmdə bir hüceyrənin konsentrasiyasına qədər ardıcıl seyreltilməsi (tarixi əhəmiyyət kəsb edir).

2. Koch metodu (“boşqab məftilləri”) – ərinmiş agarda sınaq materialının ardıcıl seyreltilməsi (temperatur 48-50 C), ardınca aqar bərkidiyi Petri qablarına tökülməsi. Peyvəndlər, bir qayda olaraq, son üç və ya dörd seyreltmədən aparılır, burada bakteriyalar az olur və sonra Petri qablarında böyüdükcə bir ilkin ana hüceyrədən əmələ gələn təcrid olunmuş koloniyalar meydana çıxır. Ağarın dərinliklərində təcrid olunmuş koloniyalardan təzə mühitdə subkultura yolu ilə təmiz bakteriya mədəniyyəti əldə edilir.

3. Şukeviç üsulu - Proteus və digər “sürünən” böyüməli mikroorqanizmlərin təmiz kulturasını almaq üçün istifadə olunur. Test materialı agar maili dibində kondensasiya suyuna aşılanır. Səyyar mikroblar (Proteus) maili ağarda qalxa bilir, hərəkətsiz formalar aşağıda, əkin yerində böyümək üçün qalır. Mədəniyyətin yuxarı kənarlarını yenidən əkməklə, təmiz bir mədəniyyət əldə edə bilərsiniz.

4. Driqalski metodu - bakterioloji praktikada geniş istifadə olunur, bu üsulda öyrənilən material bir sınaq borusunda steril şoran məhlulu və ya bulyon ilə seyreltilir. Birinci fincana bir damcı material əlavə edilir və steril şüşə spatula ilə mühitin səthinə yayılır. Sonra eyni spatula ilə (ocaq alovunda yandırmadan) ikinci və üçüncü fincanlarda eyni səpin aparılır.

Bakteriyaların hər bir peyvəndi ilə spatulada getdikcə daha az qalır və üçüncü kubokda əkin edərkən, bakteriyalar bir-birindən ayrı olaraq qida mühitinin səthinə paylanacaqdır. Qabları termostatda 1-7 gün saxladıqdan sonra (mikroorqanizmlərin böyümə sürətindən asılı olaraq) üçüncü qabda hər bir bakteriya hüceyrə klonunu əmələ gətirir, təcrid olunmuş koloniya əmələ gətirir və bu koloniya yığılmaq üçün maili agarda subkulturasiya edilir. təmiz mədəniyyət.

5. Vaynberq üsulu. Məcburi anaerobların təmiz kulturalarını təcrid edərkən xüsusi çətinliklər yaranır. Molekulyar oksigenlə təmas dərhal hüceyrə ölümünə səbəb olmazsa, toxum Drigalsky üsulu ilə aparılır, lakin bundan sonra qablar dərhal anaerostata yerləşdirilir. Ancaq yetişdirmə üsulu daha çox istifadə olunur. Onun mahiyyəti ondan ibarətdir ki, tədqiq olunan materialın seyreltilməsi ərimiş və 45-50 oC-ə qədər soyudulmuş agar qida mühitində aparılır.

6-10 ardıcıl seyreltmə aparılır, sonra sınaq borularındakı mühit tez soyudulur və qida mühitinin qalınlığına havanın keçməsinin qarşısını almaq üçün səthi parafin və neft jeli qarışığından ibarət təbəqə ilə örtülür. Bəzən qida mühiti əkin və qarışdırıldıqdan sonra steril Burri borularına və ya kapilyar Pasteur pipetlərinə köçürülür, ucları möhürlənir. Uğurlu seyreltmə ilə anaerobların təcrid olunmuş koloniyaları sınaq borularında, Burri borularında və Pasteur pipetlərində böyüyür. Təcrid olunmuş koloniyaların aydın görünməsini təmin etmək üçün aydınlaşdırılmış qida mühitlərindən istifadə olunur.

Anaerobların təcrid olunmuş koloniyalarını çıxarmaq üçün boru alov üzərində fırlanma yolu ilə bir qədər qızdırılır, divarlara bitişik agar əriyir və borunun məzmunu agar sütunu şəklində steril Petri qabına sürüşür. Aqar sütunu steril cımbızla kəsilir və koloniyalar ilgəklə çıxarılır. Çıxarılan koloniyalar təcrid olunmuş mikroorqanizmlərin inkişafı üçün əlverişli olan maye mühitə yerləşdirilir. Aqar mühiti qazı pambıq tıxacdan keçirərək Burri borusundan üfürülür.

6. Hungate metodu. Oksigenə xüsusilə yüksək həssaslığa malik olan bakteriyaların təcrid olunmuş koloniyalarını əldə etmək istədikdə (sərt aeroblar), Hungate fırlanan boru üsulundan istifadə olunur. Bunun üçün ərimiş agar mühitinə oksigen çirklərindən təmizlənmiş inert qazdan ibarət sınaq borusu vasitəsilə sabit cərəyanla bakteriyalar vurulur. Daha sonra boru bir rezin tıxacla bağlanır və borunu döndərən bir sıxacda üfüqi şəkildə yerləşdirilir; mühit sınaq borusunun divarları üzərində bərabər paylanır və nazik təbəqə halında bərkiyir. Qaz qarışığı ilə doldurulmuş sınaq borusunda nazik təbəqədən istifadə adi gözlə aydın görünən təcrid olunmuş koloniyaları əldə etməyə imkan verir.

7. Mikromanipulyatordan istifadə edərək ayrı-ayrı hüceyrələrin izolyasiyası. Mikromanipulyator, xüsusi mikropipet və ya mikroilkəkdən istifadə edərək bir hüceyrəni süspansiyondan çıxarmağa imkan verən bir cihazdır. Bu əməliyyat mikroskop altında idarə olunur. Mikroskop səhnəsində asma damcı preparatının yerləşdirildiyi nəm kamera quraşdırılır. Mikropipetlər (mikropoplar) mikroskopun baxış sahəsində hərəkəti vintlər və rıçaqlar sistemi sayəsində mikron dəqiqliyi ilə həyata keçirilən əməliyyat dayaqlarının tutacaqlarına bərkidilir. Tədqiqatçı mikroskopla baxaraq mikropipetlərlə ayrı-ayrı hüceyrələri çıxarır və hüceyrə klonunu əldə etmək üçün onları steril maye mühiti olan borulara köçürür.

L.V. Timoşenko, M.V. Çubik

Xüsusi mühitlər.

Bakteriologiyada sənaye üsulu ilə istehsal olunan quru qida mühitlərindən geniş istifadə olunur ki, bunlar sudan başqa mühitin bütün komponentlərini ehtiva edən hiqroskopik tozlardır. Onların hazırlanması üçün ucuz qeyri-ərzaq məhsullarının (balıq tullantıları, ət və sümük unu, texniki kazein) triptik həzmlərindən istifadə olunur. Onlar daşınma üçün əlverişlidir, uzun müddət saxlanıla bilir, laboratoriyaları medianın hazırlanmasının nəhəng prosesindən azad edir və medianın standartlaşdırılması məsələsinin həllinə yaxınlaşdırır. Tibb sənayesi quru mühitlərdə Endo, Levin, Ploskirev, vismut sulfit agar, qidalı agar, BP göstəricisi olan karbohidratlar və s.

Termostatlar

Mikroorqanizmlərin becərilməsi üçün termostatlar istifadə olunur.

Termostat sabit bir temperatur saxlayan bir cihazdır. Cihaz bir qızdırıcıdan, kameradan, ikiqat divarlardan ibarətdir, onların arasında hava və ya su dolaşır. Temperatur bir termostatla tənzimlənir. Əksər mikroorqanizmlərin çoxalması üçün optimal temperatur 37°C-dir.

DƏRS 7

MÖVZU: AEROBLARIN SƏM MƏDƏNİYYƏTİNİN TƏCİL EDİLMƏSİ ÜSULLARI. AEROB BAKTERİYALARIN SƏM MƏDƏNİYYƏTİNİN MEXANİK DİSSOSİSİYA ÜSULU İLE İZOLASYON ADDIMLARI

Dərs planı

1. Bakteriyaların “saf mədəniyyəti” anlayışı

2. Mexanik ayırma yolu ilə təmiz kulturaların ayrılması üsulları

3. Təmiz kulturaların ayrılması üçün bioloji üsullar

4. Bakteriyaların identifikasiyası üsulları

Dərsin məqsədi: Tələbələri təmiz kulturaları təcrid etməyin müxtəlif üsulları ilə tanış etmək, ilgək, vuruş və inyeksiya ilə səpməyi öyrətmək.

Nümayiş üçün təlimatlar

Təbii yaşayış yerlərində bakteriyalar assosiasiyalarda olur. Mikrobların xassələrini və patoloji prosesin inkişafında rolunu müəyyən etmək üçün bircins populyasiyalar (saf kulturalar) şəklində bakteriyaların olması lazımdır. Saf mədəniyyət qida mühitində yetişdirilən eyni növdən olan bakterial fərdlərin toplusudur.

Aerob bakteriyaların təmiz kulturalarının ayrılması üsulları

Paster üsulu Kox metodu Bioloji Fiziki

(tarixi var (plitənin naqilləri)

Məna)

Kimyəvi üsul

Şukeviç

Müasir

Döngə ilə əkin Bir spatula ilə əkin

(Driqalski üsulu)

Təmiz kulturaların ayrılması üsulları:

1. Mexaniki ayırma üsulları test materialını aqarın səthinə ardıcıl sürtməklə mikrobların ayrılmasına əsaslanır.

a) Paster metodu - tarixi əhəmiyyətə malikdir, maye qida mühitində sınaq materialının yuvarlanma üsulu ilə ardıcıl seyreltilməsini təmin edir

b) Kox üsulu - boşqab üsulu - sınaq materialının ətli pepton agarı ilə ardıcıl durulanmasına, sonra isə mayeləşdirilmiş material ilə sınaq borularının Petri qablarına tökülməsinə əsaslanır.

c) Driqalski üsulu - mikroflorası ilə zəngin səpilən materialı səpərkən, şpatula ilə ardıcıl səpin üçün 2-3 stəkan istifadə edin.

d) Paralel vuruşlarda ilgəklə səpin.

2. Bioloji üsullar patogenlərin bioloji xüsusiyyətlərinə əsaslanır.

a) Bioloji - yüksək həssas heyvanların infeksiyası, burada mikroblar tez çoxalır və toplanır. Bəzi hallarda, bu üsul xəstə insandan patogen mədəniyyəti təcrid etməyə imkan verən yeganə üsuldur (məsələn, tulyaremiya ilə), digər hallarda daha həssasdır (məsələn, ağ siçanlarda pnevmokokların təcrid edilməsi və ya Qvineya donuzlarında vərəmin patogeni).

b) Kimyəvi – mikobakteriyaların turşuya davamlılığına əsaslanır. Materialı müşayiət edən floradan azad etmək üçün
turşu məhlulu ilə müalicə olunur. Yalnız vərəm çöpləri böyüyəcək, çünki turşuya davamlı mikroblar turşunun təsiri altında ölür.

c) Fiziki üsul sporların istiliyə davamlılığına əsaslanır. Spora yaradan bakteriyaların kulturasını təcrid etmək
qarışıqlar, material 80°C-də qızdırılır və qidalı mühitə aşılanır. Yalnız spor bakteriyaları böyüyəcək, çünki onların sporları canlı qaldı və böyüməyə səbəb oldu.

d) Shchukeviç metodu - sürünən böyümə istehsal edə bilən Proteus vulgarisin yüksək hərəkətliliyinə əsaslanır.

Plitə aqarının hazırlanması üsulu

MPA su banyosunda əridilir, sonra 50-55°C-ə qədər soyudulur. Butulkanın boynu spirt lampasının alovunda yandırılır, Petri qabları açılır ki, şüşənin boynu qabın kənarlarına toxunmadan içəri otursun, içinə 10-15 ml MPA tökülür, qapaq qapalı, qab sarsılır ki, mühit bərabər paylansın və sərtləşənə qədər üfüqi bir səthdə qalır. Quruduqdan sonra boşqab agar boşqabları soyuqda saxlanılır.

Döngə əkilməsi

Steril soyudulmuş ilmədən istifadə edərək, bir damcı material götürün, sol əlinizlə stəkanın bir kənarını açın, ilgəyi içəriyə gətirin və əks kənarında bir ilmə ilə bir yerdə bir neçə vuruş edin, sonra ilgəyi qoparın və aşılayın. material 5-6 mm intervalla kubokun bir kənarından digərinə paralel vuruşlarda. Səpin əvvəlində, ilgəkdə çoxlu mikroblar olduqda, birləşən böyümə verəcəklər, lakin hər vuruşda ilgəkdə daha az və daha az mikroblar olur və onlar tək qalaraq təcrid olunmuş koloniyalar əmələ gətirirlər.

Driqalski üsulu ilə əkin

Bu üsul mikroflorası (irin, nəcis, bəlğəm) ilə güclü şəkildə çirklənmiş materialın aşılanması zamanı istifadə olunur. Drigalsky üsulu ilə əkmək üçün bir spatula və bir neçə fincan götürün (3-4). Spatula üçbucaq və ya L formasına bükülmüş metal məftildən və ya şüşə dartdan hazırlanmış alətdir. Material birinci stəkana bir döngə və ya pipetlə daxil edilir və bir spatula ilə mühitin səthinə bərabər paylanır; eyni spatula ilə yandırılmadan material ikinci fincandakı qida mühitinə sürtülür və sonra üçüncüdə. Belə əkinlə, ilk kubok birləşən böyüməyə sahib olacaq və sonrakı stəkanlarda təcrid olunmuş koloniyalar böyüyəcəkdir.

Mikrobiologiya, virusologiya və immunologiyanın inkişafının əsas mərhələləri

Bunlara aşağıdakılar daxildir:

1.Empirik bilik(mikroskopların ixtirasından əvvəl və onların mikrodünyanı öyrənmək üçün istifadəsi).

Contagium vivum - J. Fracastoro (1546) yoluxucu xəstəliklərin agentləri canlı təbiət təklif etmişdir.

2.Morfoloji dövr təxminən iki yüz il çəkdi.

Antonie van Leeuwenhoek 1675-ci ildə ilk olaraq 1683-cü ildə protozoa təsvir edilmişdir - bakteriyaların əsas formaları. Alətlərin qeyri-kamilliyi (X300 mikroskoplarının maksimum böyüdülməsi) və mikrodünyanın öyrənilməsi üsulları mikroorqanizmlər haqqında elmi biliklərin sürətlə toplanmasına kömək etmədi.

3.Fizioloji dövr(1875-ci ildən) - L.Paster və R.Koxun dövrü.

L.Paster - fermentasiya və çürümə proseslərinin mikrobioloji əsaslarının öyrənilməsi, sənaye mikrobiologiyasının inkişafı, təbiətdə maddələrin dövriyyəsində mikroorqanizmlərin rolunun aydınlaşdırılması, kəşf anaerob mikroorqanizmlər, prinsiplərin inkişafı asepsiya,üsulları sterilizasiya, zəifləmə ( zəifləmə)virulentlik və qəbul edir peyvəndlər (vaksin ştammları).

R. Koch - izolyasiya üsulu təmiz mədəniyyətlər bərk qida mühitlərində, bakteriyaların anilin boyaları ilə rənglənməsi üsulları, qarayara, vəba törədicilərinin aşkar edilməsi ( Koch vergülü), vərəm (Koch çubuqları), mikroskopiya texnikasının təkmilləşdirilməsi. Henle-Koch postulatları (triada) kimi tanınan Henle meyarlarının eksperimental əsaslandırılması.

4.İmmunoloji dövr.

İ.İ.Meçnikov Emil Runun obrazlı tərifinə görə “mikrobiologiyanın şairidir”. O, mikrobiologiyada yeni era - immunitet (immunitet) haqqında doktrina yaratdı, faqositoz nəzəriyyəsini inkişaf etdirdi və immunitetin hüceyrə nəzəriyyəsini əsaslandırdı.

Eyni zamanda, bədəndə istehsal haqqında məlumatlar toplandı antikorlar bakteriyalara və onlara qarşı toksinlər, bu, P.Ehrlixə immunitetin humoral nəzəriyyəsini inkişaf etdirməyə imkan verdi. Faqositik və humoral nəzəriyyələrin tərəfdarları arasında sonrakı uzunmüddətli və səmərəli müzakirələrdə immunitetin bir çox mexanizmləri aşkar edildi və elm yarandı. immunologiya.

Sonradan aşkar edilmişdir ki, irsi və qazanılmış immunitet beş əsas sistemin əlaqələndirilmiş fəaliyyətindən asılıdır: makrofaqlar, komplement, T- və B-limfositlər, interferonlar, immun cavabın müxtəlif formalarını təmin edən əsas histouyğunluq sistemi. 1908-ci ildə İ.İ.Meçnikov və P.Erlix. Nobel mükafatı verildi.

12 fevral 1892-ci il Rusiya Elmlər Akademiyasının iclasında D.İ.İvanovski tütün mozaika xəstəliyinin törədicisi süzülə bilən virus olduğunu bildirdi. Bu tarix ad günü hesab edilə bilər virusologiya, və D.İ.İvanovski onun yaradıcısıdır. Sonradan məlum oldu ki, viruslar təkcə bitkilərdə deyil, insanlarda, heyvanlarda və hətta bakteriyalarda da xəstəliklər yaradır. Lakin yalnız genin təbiəti və genetik kodu müəyyən edildikdən sonra viruslar canlı təbiət kimi təsnif edilirdi.

5. Mikrobiologiyanın inkişafının növbəti mühüm mərhələsi olmuşdur antibiotiklərin kəşfi. 1929-cu ildə A.Fleminq penisilin kəşf etdi və antibiotik terapiyası dövrü başladı, bu da tibbdə inqilabi tərəqqiyə səbəb oldu. Sonralar məlum oldu ki, mikroblar antibiotiklərə uyğunlaşır və dərmanlara qarşı müqavimət mexanizmlərinin öyrənilməsi ikinci ekstraxromosomal (plazmid) genom bakteriya.

oxuyur plazmidlər göstərdi ki, onlar viruslardan fərqli olaraq daha sadə quruluşlu orqanizmlərdir bakteriofaqlar bakteriyalara zərər vermir, lakin onlara əlavə bioloji xüsusiyyətlər verir. Plazmidlərin kəşfi həyatın mövcudluq formaları və onun təkamülünün mümkün yolları haqqında anlayışı xeyli genişləndirdi.

6. Müasir molekulyar genetik mərhələ Mikrobiologiya, virusologiya və immunologiyanın inkişafı 20-ci əsrin ikinci yarısında genetika və molekulyar biologiyanın nailiyyətləri, elektron mikroskopun yaradılması ilə əlaqədar başlanmışdır.

Bakteriyalar üzərində aparılan təcrübələr irsi xüsusiyyətlərin ötürülməsində DNT-nin rolunu sübut etmişdir. Bakteriyaların, virusların və sonradan plazmidlərin molekulyar biologiya və genetik tədqiqat obyektləri kimi istifadəsi həyatın əsasını təşkil edən fundamental proseslərin daha dərindən dərk edilməsinə səbəb olmuşdur. Bakterial DNT-də genetik məlumatın kodlaşdırılması prinsiplərinin aydınlaşdırılması və genetik kodun universallığının müəyyən edilməsi daha yüksək təşkil olunmuş orqanizmlər üçün xarakterik olan molekulyar genetik nümunələri daha yaxşı başa düşməyə imkan verdi.

Escherichia coli-nin genomunun dekodlanması genlərin layihələndirilməsinə və köçürülməsinə imkan yaradıb. İndiyə qədər Genetika Mühəndisliyi yeni istiqamətlər yaratdı biotexnologiya.

Bir çox virusların molekulyar genetik təşkili və onların hüceyrələrlə qarşılıqlı əlaqə mexanizmləri deşifrə edilmiş, virus DNT-nin həssas hüceyrənin genomuna inteqrasiya etmək qabiliyyəti və virus kanserogenezinin əsas mexanizmləri müəyyən edilmişdir.

İmmunologiya əsl inqilaba məruz qalmış, yoluxucu immunologiyanın əhatə dairəsindən xeyli kənara çıxmış və ən mühüm fundamental tibbi və bioloji fənlərdən birinə çevrilmişdir. Bu günə qədər immunologiya təkcə infeksiyalardan qorunmanı öyrənən bir elmdir. Müasir mənada İmmunologiya orqanizmin struktur və funksional bütövlüyünü qoruyaraq, orqanizmin genetik olaraq yad olan hər şeydən özünümüdafiə mexanizmlərini öyrənən bir elmdir.

İmmunologiya hazırda bir sıra ixtisaslaşdırılmış sahələri əhatə edir ki, bunlar arasında infeksion immunologiya ilə yanaşı, ən əhəmiyyətliləri immunogenetika, immunomorfologiya, transplantasiya immunologiyası, immunopatologiya, immunohematologiya, onkoimmunologiya, ontogenez immunologiyası, vaksinologiya və tətbiqi immunodiaqnostikadır.

Mikrobiologiya və virusologiya kimi əsas biologiya elmləri həmçinin öz məqsəd və vəzifələri olan bir sıra müstəqil elmi fənlər daxildir: ümumi, texniki (sənaye), kənd təsərrüfatı, baytarlıq və bəşəriyyət üçün ən böyük əhəmiyyət kəsb edənlər. tibbi mikrobiologiya və virusologiya.

Tibbi mikrobiologiya və virusologiya insanın yoluxucu xəstəliklərinin törədicisi (onların morfologiyası, fiziologiyası, ekologiyası, bioloji və genetik xüsusiyyətləri) öyrənilir, onların becərilməsi və identifikasiyası üsulları, onların diaqnostikası, müalicəsi və profilaktikası üçün xüsusi üsullar işləyib hazırlayır.