ව්යාධිජනක පිරිසිදු සංස්කෘතියක් හුදකලා කිරීම සඳහා ක්රම. ඝන පෝෂක මාධ්‍ය මත බීජ වැපිරීම මගින් සෛල ගණන නිර්ණය කිරීම (කොච් තහඩු ක්‍රමය)

පාස්චර් ක්රමය Koch ක්රමය ජීව විද්යාත්මක භෞතික

(ඓතිහාසික (ලැමිලර්) ඇත

අර්ථය) රැහැන්) Shchukevich හි රසායනික ක්රමය

නූතන

ලූපයක් සමඟ වැපිරීම spatula සමග වැපිරීම

(Drigalski ක්රමය)

පිරිසිදු සංස්කෘතීන් හුදකලා කිරීමේ ක්‍රම (යෝජනා 11):

1. යාන්ත්රික මුදා හැරීමේ ක්රමපරීක්ෂණ ද්‍රව්‍ය ඇගර් මතුපිටට අනුක්‍රමිකව අතුල්ලමින් ක්ෂුද්‍ර ජීවීන් වෙන් කිරීම මත පදනම් වේ.

ඒ) පාස්චර්ගේ ක්රමය- ඓතිහාසික වැදගත්කමක් ඇත, පෙරළීමේ ක්‍රමය භාවිතා කරමින් ද්‍රව පෝෂක මාධ්‍යයක පරීක්ෂණ ද්‍රව්‍ය අනුක්‍රමික තනුක කිරීම සඳහා සපයයි

බී) කොච් ක්රමය- තහඩු ක්‍රමය - මස්-පෙප්ටෝන් ඒගාර් සමඟ පරීක්ෂණ ද්‍රව්‍ය අනුක්‍රමික තනුක කිරීම මත පදනම්ව, පසුව තනුක කළ ද්‍රව්‍ය සමඟ පරීක්ෂණ නල පෙට්‍රි පිඟන් වලට වත් කිරීම

V) ඩ්රිගල්ස්කි ක්රමය- මයික්‍රොෆ්ලෝරා වලින් බහුල ලෙස දූෂිත ද්‍රව්‍ය වපුරන විට, spatula සමඟ අනුක්‍රමික වැපිරීම සඳහා කෝප්ප 2-3 ක් භාවිතා කරන්න.

G) සමාන්තර පහරවල් වල ලූපයක් සමඟ වැපිරීම.

2. ජීව විද්යාත්මක ක්රමව්යාධිජනකවල ජීව විද්යාත්මක ගුණාංග මත පදනම්ව.

ඒ) ජීව විද්යාත්මක- ක්ෂුද්‍ර ජීවීන් ඉක්මනින් ගුණනය වී එකතු වන ඉතා සංවේදී සතුන්ගේ ආසාදනය. සමහර අවස්ථාවල දී, මෙම ක්‍රමය රෝගී පුද්ගලයෙකුගෙන් (උදාහරණයක් ලෙස, ටියුලේමියාව සමඟ) රෝග කාරක සංස්කෘතියක් හුදකලා කිරීමට ඉඩ සලසන එකම ක්‍රමයයි, වෙනත් අවස්ථාවල දී එය වඩාත් සංවේදී වේ (නිදසුනක් ලෙස, සුදු මීයන් හෝ රෝග කාරකය තුළ pneumococcus හුදකලා කිරීම. ගිනියා ඌරන්ගේ ක්ෂය රෝගය).

බී) රසායනික- mycobacteria අම්ල ප්රතිරෝධය මත පදනම්ව. සමග ඇති ශාක වලින් ද්රව්ය නිදහස් කිරීමට, එය
අම්ල ද්රාවණය සමඟ ප්රතිකාර කරනු ලැබේ. ඇසිඩ්-ප්‍රතිරෝධී ක්ෂුද්‍ර ජීවීන් අම්ලයේ බලපෑම යටතේ මිය ගිය බැවින් ක්ෂය රෝග බැසිලි පමණක් වර්ධනය වේ.

V) භෞතික ක්රමයතාපය සඳහා බීජාණු වල ප්රතිරෝධය මත පදනම්ව. බීජාණු සාදන බැක්ටීරියා සංස්කෘතියක් හුදකලා කිරීමට
මිශ්රණ, ද්රව්යය 80 ° C දී රත් කර පෝෂක මාධ්යයක් මත එන්නත් කරනු ලැබේ. බීජාණු බැක්ටීරියා පමණක් වර්ධනය වනු ඇත, මන්ද ඔවුන්ගේ බීජාණු ජීවමානව පැවති අතර වර්ධනයට හේතු විය.

G) Shchukevich ක්රමය- බඩගා යන වර්ධනයක් ඇති කළ හැකි Proteus vulgaris හි ඉහළ සංචලනය මත පදනම් වේ.

යටත් විජිතවල සිට බෑවුම් සහිත ඒගාර් සහ එම්පීබී වෙත නැවත බීජ සිටුවීමේ ක්‍රමය:

ඒ) ජනපද සිට agar slant වෙත මාරු කිරීම

පිඟානේ පියන තරමක් විවෘත කරන්න, කැල්සින් කළ, සිසිල් කළ ලූපයක් සහිත වෙනම ජනපදයක කොටසක් ඉවත් කරන්න, වඳ බෑවුම් සහිත ආගාර් සහිත පරීක්ෂණ නළයක් විවෘත කරන්න, එය ඔබේ වම් අතේ නැඹුරු ස්ථානයක තබා ගන්න, එවිට ඔබට එහි මතුපිට නිරීක්ෂණය කළ හැකිය. මධ්යම. සංස්කෘතිය සමඟ ලූපය බිත්ති ස්පර්ශ නොකර පරීක්ෂණ නළයට මාරු කරන්න, පෝෂක මාධ්‍යය මත අතුල්ලන්න, පරීක්ෂණ නළයේ එක් දාරයේ සිට අනෙක් කෙළවරට මතුපිට දිගේ ලිස්සා යාම, පහරවල් මාධ්‍යයේ ඉහළට ඔසවන්න - ඉරි වැපිරීම. පරීක්ෂණ නළය වසා ඇති අතර, යාමට ඉඩ නොදී, එන්නත් කරන ලද ක්ෂුද්ර ජීවීන්ගේ නම සහ එන්නත් කරන දිනය අත්සන් කර ඇත.

බී) ජනපදයේ සිට මස්-පෙප්ටෝන් සුප් හොද්ද වෙත මාරු කිරීම

MPB මත නැවත සිටුවීමේ තාක්ෂණය මූලික වශයෙන් ඝන මාධ්ය මත වපුරන විට සමාන වේ. MPB මත වපුරන විට, එය මත ද්රව්ය සහිත ලූපය මාධ්යයේ ගිල්වනු ලැබේ. ද්රව්යය දුස්ස්රාවී නම් සහ ලූපයෙන් ඉවත් කළ නොහැකි නම්, එය බඳුනේ බිත්තිය මත අතුල්ලමින් පසුව දියර මාධ්යයකින් සෝදා ඇත. නිසරු පාස්චර් හෝ උපාධි සහිත පයිප්පයක් සමඟ එකතු කරන ලද දියර ද්රව්ය පෝෂක මාධ්යයට වත් කරනු ලැබේ.

ස්වාධීන කාර්යයේ ප්රතිඵලයක් වශයෙන්, ශිෂ්යයා දැනගත යුතුය:

1. ක්ෂුද්ර ජීවීන්ගේ පිරිසිදු සංස්කෘතියක් හුදකලා කිරීම සඳහා ක්රම

2. ක්ෂුද්ර ජීවීන් වගා කිරීම සඳහා ක්රම

හැකි වනු ඇත:

1. වසංගත විරෝධී පාලන තන්ත්‍රයේ නීති රීති සහ ආරක්ෂක පූර්වාරක්ෂාවන්ට අනුකූල වීමේ කුසලතා

2. ද්රව්ය විෂබීජහරණය කරන්න, දෑත් විෂබීජහරණය කරන්න

3. බැක්ටීරියා ජනපද වලින් සූදානම සකස් කරන්න

4. අන්වීක්ෂ ජනපද

5. ග්රෑම් පැල්ලම් ක්ෂුද්ර ජීවීන්

පාඩම 8

විෂය. පිරිසිදු සංස්කෘතීන් හුදකලා කිරීම සඳහා ක්රම (අඛණ්ඩව).බැක්ටීරියා වල එන්සයිම ක්රියාකාරිත්වය සහ එය අධ්යයනය කිරීම සඳහා ක්රම.

ශාකවල ඇතැම් රෝග ලක්ෂණ සහ අන්වීක්ෂීය පරීක්ෂණයේ ප්රතිඵල මත පදනම්ව, රෝගයේ රෝග කාරකය බැක්ටීරියාවක් බවට සැක කෙරේ නම්, ඊළඟ පියවර එය හුදකලා කිරීම විය යුතුය.

මෙම අවස්ථාවේ දී, රෝග කාරකය සමඟ ඇති ජීවීන් සමඟ අපවිත්‍ර වී ඇති බව උපකල්පනය කෙරේ, එනම් මිශ්‍ර ජනගහනයක් ඇත. වෙනම වැඩෙන ජනපදයක ස්වරූපයෙන් රෝග කාරකය ලබා ගැනීම සඳහා, පටක මැක්රේට් මාධ්‍යයට ඉරි දැමිය යුතුය.

ස්පර්ශයකින් වැපිරීම. calcined inoculation loop භාවිතා කරමින්, බැක්ටීරියා අඩංගු ශාක පටක macerate කුඩා ප්රමාණයක් ගෙන, සැහැල්ලු චලනයන් සමඟ, agar මතුපිටට හානි නොකර, සකස් කළ පෝෂක මාධ්යයට 4-6 පහරවල් යොදන්න. ලූපය නැවත ගණනය කිරීමෙන් පසු, මාධ්‍යය සහිත කෝප්පය 90 ° දකුණට හරවා දෙවන පහරෙන් තවත් පහර 4-6 ක් යොදනු ලැබේ, ඉඳිකටුව නැවත ගණනය කර තුන්වන වැපිරීම සිදු කෙරේ. මෙය ආරම්භක ද්‍රව්‍යයේ තනුක කිරීමක් ලබා ගනී, එනම් බැක්ටීරියා, තාප ස්ථායයක පැය 48-72 අතර කාලයක් 28 ° C දී පුර්ව ලියාපදිංචි තක්සේරු කිරීමෙන් පසුව, විවිධ හැඩයන් සහ වර්ණවලින් යුත් තනි ජනපද සාදයි. පසුව වැඩිදුර පරීක්ෂා කිරීම සඳහා ජනපද agar slant නල වෙත මාරු කරනු ලැබේ. කැල්සින් කරන ලද ලූපයක් භාවිතා කරමින්, ජනපදයක් ගෙන එය සර්පයෙකු හෝ සිග්සැග් ආකාරයෙන් ප්රවේශම් සහගත චලනයකින් පෝෂක ආගාර් මත යොදන්න.

කොච් වත් කිරීමේ ක්රමය. කොච් ප්ලේට් ක්‍රමය මඟින් එක් එක් ජනපදය තනි බැක්ටීරියා සෛලයකින් සෑදී ඇති බව සහතික කරයි. නිසරු ජලයේ ආරම්භක ද්රව්යයෙන් අත්හිටුවීමක් සකස් කිරීම සහ මෙම තනුක කිරීම සමඟ පමණක් Koch ක්රමය භාවිතා කිරීම වඩාත් සුදුසුය. 60 ° C දක්වා සිසිල් කළ පෝෂක මාධ්‍යයක් සහිත පළමු පරීක්ෂණ නළයට අත්හිටුවීමේ කුඩා ප්‍රමාණයක් මාරු කරනු ලැබේ. එවිට නළයේ අන්තර්ගතය අත්ල අතර කරකැවීමෙන් inoculum සමඟ මිශ්ර වේ. ඊළඟට, දෙවන පරීක්ෂණ නළයක් ගෙන, දාහක දැල්ලට ඉහළින් එය ප්‍රවේශමෙන් විවෘත කරන්න, සහ පළමු පරීක්ෂණ නළයෙන් උපස්ථරයේ කොටස් තුනක් එයට මාරු කිරීමට විශාල ලූප භාවිතා කරන්න. බෙල්ලට සහ නැවතුමට වෙඩි තැබීමෙන් පසු, පරීක්ෂණ නළයේ අන්තර්ගතය පළමු පෙට්‍රි පිඟානට වත් කරනු ලැබේ, පිඟානේ පියන විවෘත කර එය යටින් පරීක්ෂණ නළයේ බෙල්ල ඇතුළු කිරීමට ප්‍රමාණවත් වේ. වත් කළ වහාම කෝප්පය වසා දමා පෝෂක මාධ්‍යය ඒකාකාරව බෙදා හරින්න.

දෙවන පරීක්ෂණ නළයේ අන්තර්ගතය තරයේ මිශ්‍ර කර, තුන්වන පරීක්ෂණ නළයක් ගෙන උපස්ථරයේ කොටස් හයක් දෙවැන්නෙන් එයට ලූපයක් සමඟ මාරු කරන්න. පරීක්ෂණ නළයේ අන්තර්ගතය කෝප්පයකට වත් කරනු ලබන අතර, පරීක්ෂණ නළයේ අන්තර්ගතය මිශ්ර කිරීමෙන් පසු කෝප්පයට වත් කරනු ලැබේ. මාධ්‍යය සහිත පිඟන් 28 ° C උෂ්ණත්වයකදී තාප ස්ථායයක් තුළ තැන්පත් කරනු ලැබේ; දින කිහිපයකට පසු, ආරම්භක ද්‍රව්‍යයේ අඩංගු බැක්ටීරියා ජනපද සාදයි.

අනුක්රමික අභිජනනය. උදාහරණයක් ලෙස, පසෙන් බැක්ටීරියා හුදකලා කිරීමට අවශ්ය නම්, අනුක්රමික තනුක භාවිතා කරනු ලැබේ. වඳ පෝෂක මාධ්‍යය (කෝප්පයකට මිලි ලීටර් 15 ක්) කෝප්පවලට වත් කරනු ලැබේ, අත්හිටුවීමේ අවසාන තනුක තුනෙන් මිලි ලීටර් 0.1 ක් දෘඩ කළ ඇගාර්ට යොදන අතර වීදුරු ස්පාටුලයකින් මතුපිටට විහිදේ.

බැක්ටීරියා හුදකලා කිරීම සඳහා, පස ග්රෑම් 1 ක් ජලය මිලි ලීටර් 9 ක අත්හිටුවා, හොඳින් සොලවා, තත්පර කිහිපයක් සඳහා පදිංචි වීමට ඉඩ ලබා දෙන අතර, අත්හිටුවීමෙන් අනුක්රමික තනුක සකස් කරනු ලැබේ. මෙම ක්රමය භාවිතා කිරීමෙන්, එක් එක් සාම්පලයේ ක්ෂුද්ර ජීවීන් සංඛ්යාව තීරණය කළ හැකිය.

ඔබ දෝෂයක් සොයා ගන්නේ නම්, කරුණාකර පෙළ කැබැල්ලක් උද්දීපනය කර ක්ලික් කරන්න Ctrl+Enter.

77288 0

බැක්ටීරියා වල සංස්කෘතික ගුණාංග

ජනපදයක් යනු එක් සෛලයකින් (සෛල ක්ලෝනය) වර්ධනය වූ එකම වර්ගයේ සෛලවල හුදකලා එකතුවකි. ක්ෂුද්ර ජීවීන් වර්ධනය වන ස්ථානය මත පදනම්ව (ඝන පෝෂක මාධ්යයේ මතුපිට හෝ එහි ඝනකම), මතුපිට, ගැඹුරු සහ පහළ ජනපද වෙන් කර ඇත.

මාධ්‍යයේ මතුපිට වගා කරන ලද ජනපද විවිධ වේ: ඒවා විශේෂ-විශේෂිත වන අතර අධ්‍යයනයට භාජනය වන බෝගයේ විශේෂය තීරණය කිරීමට ඔවුන්ගේ අධ්‍යයනය භාවිතා කරයි.

ජනපද විස්තර කිරීමේදී පහත ලක්ෂණ සැලකිල්ලට ගනී:
1) යටත් විජිතයේ හැඩය - රවුම්, amoeboid, rhizoid, අවිධිමත්, ආදිය;

2) යටත් විජිතයේ විශාලත්වය (විෂ්කම්භය) - ඉතා කුඩා (උල්) (0.1-0.5 මි.මී.), කුඩා (0.5-3 මි.මී.), මධ්යම ප්රමාණයේ (3-5 මි.මී.) සහ විශාල (විෂ්කම්භය 5 ට වැඩි );

3) ජනපදයේ මතුපිට සිනිඳු, රළු, නැමුණු, රැලි සහිත, කේන්ද්‍රීය කවයන් සහිත හෝ රේඩියල් ඉරි සහිත ය;

4) ජනපද පැතිකඩ - පැතලි, උත්තල, කේතු හැඩැති, ආවාට හැඩැති, ආදිය;

5) විනිවිදභාවය - අඳුරු, මැට්, දිලිසෙන, විනිවිද පෙනෙන, කුඩු;

6) ජනපදයේ වර්ණය (වර්ණක) - අවර්ණ හෝ වර්ණක (සුදු, කහ, රන්වන්, රතු, කළු), විශේෂයෙන් එහි වර්ණ ගැන්වීම සමඟ මාධ්‍යයට වර්ණක මුදා හැරීම සටහන් කරන්න;

7) ජනපදයේ මායිම - සිනිඳු, රැලි සහිත, හකුරු, ෆ්රින්ඩ්, ආදිය;

8) ජනපද ව්‍යුහය - සමජාතීය, සියුම් හෝ රළු, ඉරි සහිත; යටත් විජිතයේ මායිම සහ ව්‍යුහය තීරණය කරනු ලබන්නේ විශාලන වීදුරුවක් භාවිතයෙන් හෝ අන්වීක්ෂයක අඩු විශාලනයකින්, එන්නත් සහිත පෙට්‍රි කෑමක් අන්වීක්ෂ මේසය මත පියන පහළින් තැබීමෙනි;

9) ජනපදයේ අනුකූලතාව; ලූපයක් සමඟ මතුපිට ස්පර්ශ කිරීමෙන් තීරණය කරනු ලැබේ: ජනපදය ඝන, මෘදු, agar දක්වා වර්ධනය විය හැක, ශ්ලේෂ්මල (ලූපය පිටුපසට විහිදේ), බිඳෙන සුළු (ලූපය සමඟ ස්පර්ශ වන විට පහසුවෙන් කැඩී යයි).

ගැඹුරු ජනපද බොහෝ විට පෙනෙන්නේ අඩු හෝ වැඩි වශයෙන් සමතලා වූ පරිප්පු (උල් වූ කෙළවර සහිත ඕවලාකාර හැඩය), සමහර විට නූල් වැනි කපු පුළුන් ගැටිති පෝෂක මාධ්‍යයට ඇතුළු වේ. ක්ෂුද්ර ජීවීන් වායුව මුදා හරිනු ලැබුවහොත්, ගැඹුරු ජනපද පිහිටුවීම බොහෝ විට ඝන මාධ්යයේ කැඩී යාමත් සමඟ ඇත.

පහළ ජනපද සාමාන්‍යයෙන් පෙනෙන්නේ පතුල දිගේ පැතිරී ඇති තුනී විනිවිද පෙනෙන පටල මෙනි.

ජනපදයේ ලක්ෂණ වයස සමඟ වෙනස් විය හැක; ඒවා මාධ්‍යයේ සංයුතිය සහ වගා උෂ්ණත්වය මත රඳා පවතී.

ද්රව පෝෂක මාධ්ය මත ක්ෂුද්ර ජීවීන්ගේ වර්ධනය ස්ථාවර තත්ව යටතේ වගා කරන ලද දින හතරේ සිට හත දක්වා සංස්කෘතීන් භාවිතා කිරීම සැලකිල්ලට ගනී.

ද්රව පෝෂක මාධ්ය තුළ, ක්ෂුද්ර ජීවීන්ගේ වර්ධනය සමග, මාධ්යයේ කැළඹීම සහ චිත්රපටයක් හෝ අවසාදිතයක් ඇතිවීම නිරීක්ෂණය කරනු ලැබේ.

අර්ධ දියර (0.5-0.7% agar) පෝෂක මාධ්‍ය මත වැඩෙන විට, ජංගම ක්ෂුද්‍ර ජීවීන් ප්‍රකාශිත කැළඹීමක් ඇති කරයි, නිශ්චල ආකෘති වර්ධනය වන්නේ මාධ්‍යයට එන්නත් කිරීමෙන් වපුරන අතරතුර පමණි.

බොහෝ විට ක්ෂුද්ර ජීවීන්ගේ වර්ධනය සුවඳ පෙනුම, පරිසරයේ වර්ණක සහ වායුව මුදා හැරීම සමඟ ඇත. සමහර බැක්ටීරියා වර්ගවල සංස්කෘතීන්ගේ ලාක්ෂණික සුවඳ විවිධ එස්ටර (එතිල් ඇසිටේට්, ඇමයිල් ඇසිටේට්, ආදිය), ඉන්ඩෝල්, මර්කැප්ටන්, හයිඩ්‍රජන් සල්ෆයිඩ්, ස්කැටෝල්, ඇමෝනියා, බියුටිරික් අම්ලය සෑදීම සමඟ සම්බන්ධ වේ.

වර්ණක සෑදීමේ හැකියාව බොහෝ වර්ගවල ක්ෂුද්ර ජීවීන් තුළ ආවේනික වේ. වර්ණකවල රසායනික ස්වභාවය විවිධාකාර වේ: කැරොටිනොයිඩ්, ඇන්තොසියානින්, මෙලනින්. වර්ණකය ජලයේ දිය නොවන නම්, සංස්කෘතික ඵලකය පමණක් පැල්ලම් වේ; එය ද්‍රාව්‍ය නම්, පෝෂක මාධ්‍යය ද වර්ණවත් වේ. වර්ණක සූර්යාලෝකයේ හානිකර බලපෑම් වලින් බැක්ටීරියා ආරක්ෂා කරන බව විශ්වාස කෙරේ, එම නිසා වාතයේ වර්ණක බැක්ටීරියා විශාල ප්‍රමාණයක් ඇත; ඊට අමතරව, වර්ණක මෙම ක්ෂුද්‍ර ජීවීන්ගේ පරිවෘත්තීය ක්‍රියාවලියට සම්බන්ධ වේ.

සොබාදහමේදී, ඊනියා පොස්පරස් බැක්ටීරියා ඇත, ඒවායේ සංස්කෘතීන් හරිත-නිල් හෝ කහ පැහැති ආලෝකයකින් අඳුරේ දිදුලයි. එවැනි බැක්ටීරියා ප්රධාන වශයෙන් ගංගා හෝ මුහුදු ජලයේ දක්නට ලැබේ. දීප්තිමත් බැක්ටීරියා - photobacteria - aerobic බැක්ටීරියා (vibrios, cocci, rods) ඇතුළත් වේ.

ක්ෂුද්ර ජීවීන්ගේ පිරිසිදු සංස්කෘතීන් හුදකලා කිරීම

අධ්යයනය යටතේ ඇති ද්රව්ය (ජලය, පස, වාතය, ආහාර හෝ වෙනත් වස්තූන්) සාමාන්යයෙන් ක්ෂුද්ර ජීවීන්ගේ සංගම් අඩංගු වේ.

පිරිසිදු සංස්කෘතියක් හුදකලා කිරීම මගින් රූප විද්‍යාත්මක, සංස්කෘතික, ජෛව රසායනික, ප්‍රතිදේහජනක සහ වෙනත් ලක්ෂණ අධ්‍යයනය කිරීමට හැකි වේ, එහි සම්පූර්ණත්වය රෝග කාරකයේ විශේෂය සහ වර්ගය තීරණය කරයි, එනම් එය හඳුනා ගැනීම සිදු කෙරේ.

ක්ෂුද්ර ජීවීන්ගේ පිරිසිදු සංස්කෘතීන් හුදකලා කිරීම සඳහා, කණ්ඩායම් කිහිපයකට බෙදිය හැකි ක්රම භාවිතා කරනු ලැබේ:
1. පාස්චර්ගේ ක්‍රමය - පරිමාවේ එක් සෛලයක සාන්ද්‍රණයට ද්‍රව පෝෂක මාධ්‍යයක පරීක්ෂණ ද්‍රව්‍ය අනුක්‍රමික තනුක කිරීම (ඓතිහාසික වැදගත්කමක් ඇත).

2. කෝච් ක්‍රමය (“තහඩු රැහැන්”) - උණු කළ ඒගාර් (උෂ්ණත්වය 48-50 C) හි පරීක්ෂණ ද්‍රව්‍ය අනුක්‍රමික තනුක කිරීම, ඉන්පසු පෙට්‍රි පිඟන් වලට වත් කිරීම, එහිදී ඇගාර් ඝන වීම. රීතියක් ලෙස, එන්නත් කරනු ලබන්නේ අවසාන තනුක තුන හතරෙන්, බැක්ටීරියා ස්වල්පයක් බවට පත්වන අතර පසුව, ඒවා පෙට්‍රි කෑම මත වැඩෙන විට, හුදකලා ජනපද දිස්වන අතර, එක් ආරම්භක මව් සෛලයකින් සෑදී ඇත. ආගාර්හි ගැඹුරු හුදකලා ජනපද වලින්, නැවුම් මාධ්‍ය මතට උප සංස්කෘතිය මගින් පිරිසිදු බැක්ටීරියා සංස්කෘතියක් ලබා ගනී.

3. Shukevich ක්රමය - " බඩගා යන" වර්ධනය සමග Proteus සහ අනෙකුත් ක්ෂුද්ර ජීවීන්ගේ පිරිසිදු සංස්කෘතියක් ලබා ගැනීමට භාවිතා කරයි. පරීක්ෂණ ද්‍රව්‍ය ආගාර් බෑවුමේ පාදයේ ඝනීභවනය වන ජලයට එන්නත් කරනු ලැබේ. ජංගම ක්ෂුද්‍ර ජීවීන්ට (Proteus) බෑවුම් සහිත ආගාර් ඉහළට නැඟීමට හැකි වේ, නිශ්චල ආකෘති වපුරන ස්ථානයේ පහළින් වර්ධනය වේ. සංස්කෘතියේ ඉහළ දාර නැවත සිටුවීමෙන් ඔබට පිරිසිදු සංස්කෘතියක් ලබා ගත හැකිය.

4. ඩ්‍රිගල්ස්කි ක්‍රමය - බැක්ටීරියා විද්‍යාත්මක භාවිතයේදී බහුලව භාවිතා වන අතර, අධ්‍යයනය කරන ද්‍රව්‍ය වඳ සේලයින් ද්‍රාවණය හෝ සුප් හොද්ද සමඟ පරීක්ෂණ නළයක තනුක කර ඇත. ද්රව්යයේ එක් බිංදුවක් පළමු කෝප්පයට එකතු කර විෂබීජ සහිත වීදුරු spatula සමඟ මාධ්යයේ මතුපිට පැතිර ඇත. ඉන්පසුව, එම spatula සමග (එය දාහක දැල්ලෙන් එය පුළුස්සා නොගෙන), එම වපුරන දෙවන හා තුන්වන කෝප්පවල සිදු කරනු ලැබේ.

එක් එක් බැක්ටීරියා එන්නත් කිරීමත් සමඟම, ස්පාටුලය මත අඩුවෙන් ඉතිරි වන අතර, තුන්වන කෝප්පය මත වපුරන විට, බැක්ටීරියා පෝෂක මාධ්‍යයේ මතුපිටින් වෙන වෙනම බෙදා හරිනු ලැබේ. පිඟන් තාප ස්ථායයක (ක්ෂුද්‍ර ජීවීන්ගේ වර්ධන වේගය අනුව) තබා දින 1-7 කට පසු, තුන්වන කෑමක් මත, සෑම බැක්ටීරියාවක්ම සෛල ක්ලෝනයක් නිපදවන අතර, හුදකලා ජනපදයක් සාදයි, එය සමුච්චය කිරීම සඳහා බෑවුම් සහිත ආගාර් මත උප සංස්කෘතියක් ඇති කරයි. පිරිසිදු සංස්කෘතියක්.

5. වෙයින්බර්ග් ක්රමය. අනිවාර්ය නිර්වායු වල පිරිසිදු සංස්කෘතීන් හුදකලා කිරීමේදී විශේෂ දුෂ්කරතා පැන නගී. අණුක ඔක්සිජන් සමඟ සම්බන්ධ වීම වහාම සෛල මරණයට හේතු නොවන්නේ නම්, ඩ්‍රිගල්ස්කි ක්‍රමයට අනුව බීජ වැපිරීම සිදු කරනු ලැබේ, නමුත් මෙයින් පසු පිඟන් වහාම නිර්වායු ස්ථායයක තබා ඇත. කෙසේ වෙතත්, අභිජනන ක්රමය බොහෝ විට භාවිතා වේ. එහි සාරය පවතින්නේ අධ්‍යයනයට භාජනය වන ද්‍රව්‍ය තනුක කිරීම උණු කොට 45-50 oC agar පෝෂක මාධ්‍යයට සිසිල් කිරීමෙනි.

අනුක්‍රමික තනුක 6-10 ක් සිදු කරනු ලැබේ, පසුව පරීක්ෂණ නල වල මාධ්‍යය ඉක්මනින් සිසිල් වන අතර පෝෂක මාධ්‍යයේ ඝනකමට වාතය විනිවිද යාම වැළැක්වීම සඳහා මතුපිට පැරෆින් සහ පෙට්‍රෝලියම් ජෙලි මිශ්‍රණයක තට්ටුවකින් ආවරණය කරයි. සමහර විට පෝෂක මාධ්‍යය, වැපිරීමෙන් හා මිශ්‍ර කිරීමෙන් පසු, වඳ බුරී නල හෝ කේශනාලිකා පාස්චර් පයිප්පවලට මාරු කරනු ලැබේ, එහි කෙළවර මුද්‍රා තබා ඇත. සාර්ථක තනුක කිරීමත් සමඟ, නිර්වායු හුදකලා ජනපද පරීක්ෂණ නල, බුරි නල සහ පාස්චර් පයිප්පවල වර්ධනය වේ. හුදකලා ජනපද පැහැදිලිව පෙනෙන බව සහතික කිරීම සඳහා, පැහැදිලි කළ පෝෂක මාධ්ය භාවිතා කරනු ලැබේ.

නිර්වායු ජීවීන්ගේ හුදකලා ජනපද නිස්සාරණය කිරීම සඳහා, නළය දැල්ලක් මත කරකැවීමෙන් තරමක් රත් කරනු ලබන අතර, බිත්තිවලට යාබදව ඇති ඒගාර් දිය වී ඇගාර් තීරුවක ස්වරූපයෙන් බටයේ අන්තර්ගතය වඳ පෙට්‍රි කෑමක් බවට ලිස්සා යයි. ආගාර් තීරුව වඳ කරකැවිල්ලකින් කපා ඇති අතර ලූපයකින් ජනපද ඉවත් කරනු ලැබේ. නිස්සාරණය කරන ලද ජනපද හුදකලා ක්ෂුද්ර ජීවීන්ගේ වර්ධනය සඳහා හිතකර ද්රව මාධ්යයක තබා ඇත. කපු ප්ලග් එකක් හරහා වායුව යැවීමෙන් ඇගාර් මාධ්‍යය Burri බටයෙන් පිටතට ගසනු ලැබේ.

6. Hungate ක්රමය. ඔක්සිජන් (දැඩි aerobes) සඳහා විශේෂයෙන් ඉහළ සංවේදීතාවයක් සහිත බැක්ටීරියා වල හුදකලා ජනපද ලබා ගැනීමට අවශ්ය වූ විට, Hungate භ්රමණය වන නල ක්රමය භාවිතා වේ. මෙය සිදු කිරීම සඳහා, ඔක්සිජන් අපද්‍රව්‍ය වලින් නිදහස් කරන ලද නිෂ්ක්‍රීය වායුවේ පරීක්ෂණ නළයක් හරහා උණු කළ ඒගාර් මාධ්‍යය නියත ධාරාවකින් බැක්ටීරියා සමඟ එන්නත් කරනු ලැබේ. එවිට නළය රබර් නැවතුමකින් මුද්රා කර නළය භ්රමණය වන කලම්පයක තිරස් අතට තබා ඇත; මාධ්‍යය පරීක්ෂණ නළයේ බිත්ති මත ඒකාකාරව බෙදා හරින අතර තුනී ස්ථරයක් බවට පත් වේ. ගෑස් මිශ්රණයකින් පුරවා ඇති පරීක්ෂණ නළයක තුනී ස්ථරයක් භාවිතා කිරීම පියවි ඇසට පැහැදිලිව පෙනෙන හුදකලා ජනපද ලබා ගැනීමට ඉඩ සලසයි.

7. micromanipulator භාවිතා කරන තනි සෛල හුදකලා කිරීම. micromanipulator යනු විශේෂ micropipette හෝ microloop භාවිතයෙන් අත්හිටුවීමකින් එක් සෛලයක් ඉවත් කිරීමට ඔබට ඉඩ සලසන උපකරණයකි. මෙම මෙහෙයුම අන්වීක්ෂයක් යටතේ පාලනය වේ. අන්වීක්ෂ වේදිකාවේ තෙතමනය සහිත කුටියක් සවි කර ඇති අතර, එල්ලෙන බිංදු සකස් කිරීම තබා ඇත. මයික්‍රොපිපෙට් (මයික්‍රොපොප්) ක්‍රියාකාරී ස්ටෑන්ඩ් වල රඳවනයන් තුළ සවි කර ඇති අතර, අන්වීක්ෂයේ දර්ශන ක්ෂේත්‍රයේ චලනය මයික්‍රෝන නිරවද්‍යතාවයෙන් සිදු කරනු ලබන්නේ ඉස්කුරුප්පු සහ ලීවර පද්ධතියකට ස්තුති කරමිනි. පර්යේෂකයා, අන්වීක්ෂයක් හරහා බලමින්, මයික්‍රොපිපෙට් සහිත තනි සෛල ඉවත් කර සෛල ක්ලෝනයක් ලබා ගැනීම සඳහා වඳ ද්‍රව මාධ්‍යයක් අඩංගු නල වලට මාරු කරයි.

එල්.වී. Timoschenko, M.V. චුබික්

විශේෂ පරිසරයන්.

බැක්ටීරියා විද්‍යාවේදී, කාර්මික වශයෙන් නිපදවන වියළි පෝෂක මාධ්‍ය බහුලව භාවිතා වන අතර ඒවා ජලය හැර මාධ්‍යයේ සියලුම සංරචක අඩංගු ජලාකර්ෂණීය කුඩු වේ. ඒවා සකස් කිරීම සඳහා ලාභ ආහාර නොවන නිෂ්පාදන (මාළු අපද්‍රව්‍ය, මස් සහ අස්ථි ආහාර, තාක්ෂණික කැසීන්) වල ට්‍රිප්ටික් ජීර්ණය භාවිතා කරනු ලැබේ. ඒවා ප්‍රවාහනය සඳහා පහසු වන අතර, දිගු කාලයක් ගබඩා කළ හැකි අතර, මාධ්‍ය සැකසීමේ දැවැන්ත ක්‍රියාවලියෙන් රසායනාගාර මුදා හැරීම සහ මාධ්‍ය ප්‍රමිතිකරණය පිළිබඳ ගැටළුව විසඳීමට ඒවා සමීප කරවයි. වෛද්‍ය කර්මාන්තය වියළි මාධ්‍ය එන්ඩෝ, ලෙවින්, ප්ලොස්කිරෙව්, බිස්මට් සල්ෆයිට් ඒගාර්, පෝෂක ඒගාර්, බීපී දර්ශකය සමඟ කාබෝහයිඩ්‍රේට් සහ වෙනත් අය නිෂ්පාදනය කරයි.

උෂ්ණත්ව පාලක

ක්ෂුද්ර ජීවීන් වගා කිරීම සඳහා උෂ්ණත්ව පාලක භාවිතා වේ.

උෂ්ණත්ව පාලකයක් යනු නියත උෂ්ණත්වයක් පවත්වා ගෙන යන උපකරණයකි. උපාංගය වාතය හෝ ජලය සංසරණය වන අතර තාපකයක්, කුටියක්, ද්විත්ව බිත්ති වලින් සමන්විත වේ. උෂ්ණත්වය නියාමනය කරනු ලබන්නේ උෂ්ණත්ව පාලකයක් මගිනි. බොහෝ ක්ෂුද්ර ජීවීන්ගේ ප්රතිනිෂ්පාදනය සඳහා ප්රශස්ත උෂ්ණත්වය 37 ° C වේ.

පාඩම 7

මාතෘකාව: Aerobes හි පිරිසිදු සංස්කෘතිය හුදකලා කිරීමේ ක්රම. යාන්ත්‍රික විඝටන ක්‍රමය මගින් Aerobic බැක්ටීරියා පිරිසිදු සංස්කෘතිය හුදකලා කිරීමේ පියවර

පාඩම් සැලැස්ම

1. බැක්ටීරියා "පිරිසිදු සංස්කෘතිය" පිළිබඳ සංකල්පය

2. යාන්ත්රික වෙන් කිරීම මගින් පිරිසිදු සංස්කෘතීන් හුදකලා කිරීම සඳහා ක්රම

3. පිරිසිදු සංස්කෘතීන් හුදකලා කිරීම සඳහා ජීව විද්යාත්මක ක්රම

4. බැක්ටීරියා හඳුනාගැනීමේ ක්රම

පාඩමේ අරමුණ:පිරිසිදු සංස්කෘතීන් හුදකලා කිරීමේ විවිධ ක්‍රම පිළිබඳව සිසුන් දැනුවත් කිරීම, ලූපයක්, පහරක් සහ එන්නත් සමඟ වපුරන ආකාරය ඉගැන්වීම

ප්රදර්ශනය සඳහා මාර්ගෝපදේශ

ඔවුන්ගේ ස්වභාවික වාසභූමිය තුළ බැක්ටීරියා ආශ්රිතව දක්නට ලැබේ. ක්ෂුද්ර ජීවීන්ගේ ගුණාංග සහ ව්යාධි ක්රියාවලිය වර්ධනය කිරීමේදී ඔවුන්ගේ භූමිකාව තීරණය කිරීම සඳහා, සමජාතීය ජනගහන (පිරිසිදු සංස්කෘතීන්) ආකාරයෙන් බැක්ටීරියා ඇති කිරීම අවශ්ය වේ. පිරිසිදු සංස්කෘතියක් යනු පෝෂක මාධ්‍යයක් මත වගා කරන එකම විශේෂයේ බැක්ටීරියා පුද්ගලයින්ගේ එකතුවකි.

aerobic බැක්ටීරියා පිරිසිදු සංස්කෘතීන් හුදකලා කිරීම සඳහා ක්රම

පාස්චර් ක්රමය Koch ක්රමය ජීව විද්යාත්මක භෞතික

(ඉතිහාසගත (තහඩු රැහැන් ඇත)

තේරුම)

රසායනික ක්රමය

ෂුකෙවිච්

නූතන

ලූපයක් සමඟ වැපිරීම spatula සමග වැපිරීම

(Drigalski ක්රමය)

පිරිසිදු සංස්කෘතීන් හුදකලා කිරීමේ ක්රම:

1. යාන්ත්‍රික වෙන් කිරීමේ ක්‍රම පදනම් වී ඇත්තේ ඇගර් මතුපිටට පරීක්ෂණ ද්‍රව්‍ය අනුක්‍රමික අතුල්ලමින් ක්ෂුද්‍ර ජීවීන් වෙන් කිරීම මත ය.

අ) පාස්චර්ගේ ක්‍රමය - ඓතිහාසික වැදගත්කමක් ඇත, පෙරළීමේ ක්‍රමය මගින් ද්‍රව පෝෂක මාධ්‍යයක පරීක්ෂණ ද්‍රව්‍ය අනුක්‍රමික තනුක කිරීම සඳහා සපයයි.

b) Koch ගේ ක්‍රමය - තහඩු ක්‍රමය - මස් පෙප්ටෝන් ඒගාර් සමඟ පරීක්ෂණ ද්‍රව්‍ය අනුක්‍රමික තනුක කිරීම මත පදනම් වේ, පසුව තනුක කළ ද්‍රව්‍ය සමඟ පරීක්ෂණ නල පෙට්‍රි කෑමවලට වත් කිරීම.

ඇ) ඩ්‍රිගල්ස්කි ක්‍රමය - මයික්‍රොෆ්ලෝරා සමඟ බහුල ලෙස බීජ වපුරන ද්‍රව්‍ය වපුරන විට, spatula සමඟ අනුක්‍රමික වපුරන සඳහා 2-3 කෝප්ප භාවිතා කරන්න.

ඈ) සමාන්තර පහරවල් වල ලූපයක් සමඟ වැපිරීම.

2. ජීව විද්‍යාත්මක ක්‍රම රෝග කාරක වල ජීව විද්‍යාත්මක ගුණාංග මත පදනම් වේ.

අ) ජීව විද්‍යාත්මක - ක්ෂුද්‍ර ජීවීන් ඉක්මනින් ගුණ කර සමුච්චය වන ඉතා සංවේදී සතුන්ගේ ආසාදනය. සමහර අවස්ථා වලදී, මෙම ක්‍රමය රෝග කාරක සංස්කෘතිය රෝගී පුද්ගලයෙකුගෙන් හුදකලා කිරීමට ඉඩ සලසන එකම ක්‍රමයයි (නිදසුනක් ලෙස, ටියුලරේමියාව සමඟ), වෙනත් අවස්ථාවල දී එය වඩාත් සංවේදී වේ (නිදසුනක් ලෙස, සුදු මීයන් තුළ pneumococcus හුදකලා කිරීම හෝ ගිනියා ඌරන් තුළ ක්ෂය රෝගයේ ව්යාධිජනකය).

b) රසායනික - mycobacteria වල අම්ල ප්රතිරෝධය මත පදනම්ව. සමග ඇති ශාක වලින් ද්රව්ය නිදහස් කිරීමට, එය
අම්ල ද්රාවණය සමඟ ප්රතිකාර කරනු ලැබේ. ඇසිඩ්-ප්‍රතිරෝධී ක්ෂුද්‍ර ජීවීන් අම්ලයේ බලපෑම යටතේ මිය ගිය බැවින් ක්ෂය රෝග බැසිලි පමණක් වර්ධනය වේ.

ඇ) භෞතික ක්‍රමය පදනම් වී ඇත්තේ බීජාණුවල තාප ප්‍රතිරෝධය මත ය. බීජාණු සාදන බැක්ටීරියා සංස්කෘතියක් හුදකලා කිරීමට
මිශ්රණ, ද්රව්යය 80 ° C දී රත් කර පෝෂක මාධ්යයක් මත එන්නත් කරනු ලැබේ. බීජාණු බැක්ටීරියා පමණක් වර්ධනය වනු ඇත, මන්ද ඔවුන්ගේ බීජාණු ජීවමානව පැවති අතර වර්ධනයට හේතු විය.

d) Shchukevich ගේ ක්‍රමය - බඩගා යන වර්ධනය නිපදවීමේ හැකියාව ඇති Proteus vulgaris හි ඉහළ සංචලනය මත පදනම් වේ.

තහඩු agar සකස් කිරීමේ ක්රමය

MPA ජල ස්නානයක උණු කර, පසුව 50-55 ° C දක්වා සිසිල් කරනු ලැබේ. බෝතලයේ බෙල්ල ඇල්කොහොල් ලාම්පුවක දැල්ලෙන් පුළුස්සා දමනු ලැබේ, පෙට්‍රි පිඟන් කෝප්පයේ දාරවලට අත නොතබන ලෙස බෝතලයේ බෙල්ලට ගැලපෙන පරිදි විවෘත කරනු ලැබේ, MPA මිලි ලීටර් 10-15 ක් වත් කරනු ලැබේ, පියන වසා දමා, පිඟාන සොලවා මාධ්‍යය ඒකාකාරව බෙදා හරින අතර එය දැඩි වන තෙක් තිරස් මතුපිටක් මත තබයි. වියළීමකින් පසු, තහඩු agar තහඩු සීතල තුළ ගබඩා කර ඇත.

ලූප් වැපිරීම

විෂබීජහරණය කළ සිසිල් කළ ලූපයක් භාවිතා කර, ද්‍රව්‍ය බිංදුවක් ගෙන, ඔබේ වම් අතෙන් කෝප්පයේ එක් දාරයක් විවෘත කර, ලූපය ඇතුළට ගෙන ගොස් ප්‍රතිවිරුද්ධ දාරයේ ලූපයකින් එක තැනක පහර කිහිපයක් කරන්න, ඉන්පසු ලූපය ඉරා එන්නත් කරන්න. මිලිමීටර් 5-6 අතර පරතරයකින් කෝප්පයේ එක් දාරයේ සිට අනෙක් කෙළවරට සමාන්තර පහරවල් ඇති ද්‍රව්‍යය. වපුරන ආරම්භයේ දී, ලූප් මත ක්ෂුද්ර ජීවීන් ගොඩක් ඇති විට, ඔවුන් සංගත වර්ධනයක් ලබා දෙනු ඇත, නමුත් එක් එක් ආඝාතය සමඟ ලූපය මත ක්ෂුද්ර ජීවීන් අඩු හා අඩු වන අතර, ඔවුන් හුදකලා වී හුදකලා ජනපද නිපදවනු ඇත.

Drigalsky ක්රමයට අනුව වැපිරීම

මයික්‍රොෆ්ලෝරා (සැරව, මලපහ, ස්පුටම්) සමඟ දැඩි ලෙස දූෂිත ද්‍රව්‍ය එන්නත් කිරීමේදී මෙම ක්‍රමය භාවිතා වේ. ඩ්‍රිගල්ස්කි ක්‍රමය භාවිතයෙන් වැපිරීමට, ස්පාටුලයක් සහ කෝප්ප කිහිපයක් (3-4) ගන්න. spatula යනු ත්‍රිකෝණයකට හෝ L-හැඩයට නැමුණු ලෝහ කම්බි හෝ වීදුරු ඩාර්ට් වලින් සාදන ලද මෙවලමකි. ද්‍රව්‍යය පළමු කෝප්පයට ලූපයක් හෝ පයිප්පයකින් හඳුන්වා දී මාධ්‍යයේ මතුපිට ස්පාටුලයකින් ඒකාකාරව බෙදා හරිනු ලැබේ; එම spatula සමඟම, එය දහනය නොකර, ද්‍රව්‍යය දෙවන කෝප්පයේ පෝෂක මාධ්‍යයට අතුල්ලනු ලැබේ, පසුව තුන්වෙනි එකේ. එවැනි වැපිරීමත් සමඟ, පළමු කෝප්පයේ සංඝටක වර්ධනයක් ඇති අතර, පසුව කෝප්පවල හුදකලා ජනපද වර්ධනය වේ.

ක්ෂුද්‍රජීව විද්‍යාව, වෛරස් විද්‍යාව සහ ප්‍රතිශක්ති විද්‍යාව සංවර්ධනය කිරීමේ ප්‍රධාන අදියර

මේවාට පහත සඳහන් දෑ ඇතුළත් වේ:

1.ආනුභවික දැනුම(අන්වීක්ෂ සොයා ගැනීමට සහ ක්ෂුද්‍ර ලෝකය අධ්‍යයනය සඳහා ඒවා භාවිතා කිරීමට පෙර).

J. Fracastoro (1546) විසින් බෝවන රෝග කාරකයන්ගේ ජීවමාන ස්වභාවය යෝජනා කළේය - contagium vivum.

2.රූප විද්යාත්මක කාලයඅවුරුදු දෙසීයක් පමණ ගත විය.

1675 දී Antonie van Leeuwenhoek ප්‍රථම වරට විස්තර කරන ලද ප්‍රොටෝසෝවා, 1683 දී - බැක්ටීරියා වල ප්‍රධාන ආකාර. උපකරණවල අසම්පූර්ණත්වය (X300 අන්වීක්ෂවල උපරිම විශාලනය) සහ ක්ෂුද්‍ර ලෝකය අධ්‍යයනය කිරීමේ ක්‍රම ක්ෂුද්‍ර ජීවීන් පිළිබඳ විද්‍යාත්මක දැනුම වේගයෙන් සමුච්චය වීමට දායක නොවීය.

3.කායික කාලය(1875 සිට) - L. Pasteur සහ R. Koch යුගය.

L. පාස්චර් - පැසවීම සහ ක්ෂය වීමේ ක්‍රියාවලීන්හි ක්ෂුද්‍රජීව විද්‍යාත්මක පදනම් අධ්‍යයනය කිරීම, කාර්මික ක්ෂුද්‍රජීව විද්‍යාව සංවර්ධනය කිරීම, සොබාදහමේ ද්‍රව්‍ය සංසරණයෙහි ක්ෂුද්‍ර ජීවීන්ගේ භූමිකාව පැහැදිලි කිරීම, සොයා ගැනීම නිර්වායුක්ෂුද්ර ජීවීන්, මූලධර්ම සංවර්ධනය asepsis,ක්රම විෂබීජහරණය,දුර්වල කිරීම ( දුර්වල වීම)වයිරසයසහ ලැබීම එන්නත් (එන්නත් වික්රියා).

R. Koch - හුදකලා ක්රමය පිරිසිදු සංස්කෘතීන්ඝන පෝෂක මාධ්‍ය මත, ඇනිලීන් ඩයි සමඟ බැක්ටීරියාව පැල්ලම් කිරීමේ ක්‍රම, ඇන්ත්‍රැක්ස්, කොලරාව රෝග කාරක සොයා ගැනීම ( කොච් කොමාව), ක්ෂය රෝගය (කොච් සැරයටි),අන්වීක්ෂීය තාක්ෂණික ක්රම වැඩිදියුණු කිරීම. Henle-Koch postulates (triad) ලෙස හඳුන්වන Henle නිර්ණායකයේ පර්යේෂණාත්මක තහවුරු කිරීම.

4.ප්රතිශක්තිකරණ කාලය.

I.I. Mechnikov යනු Emil Roux හි සංකේතාත්මක අර්ථ දැක්වීමට අනුව "ක්ෂුද්‍ර ජීව විද්‍යාවේ කවියා" ය. ඔහු ක්ෂුද්‍රජීව විද්‍යාවේ නව යුගයක් නිර්මාණය කළේය - ප්‍රතිශක්තිය (ප්‍රතිශක්තිය) පිළිබඳ මූලධර්මය, ෆාගෝසයිටෝසිස් න්‍යාය වර්ධනය කිරීම සහ ප්‍රතිශක්තිය පිළිබඳ සෛලීය න්‍යාය සනාථ කිරීම.

ඒ සමගම, ශරීරයේ නිෂ්පාදනය පිළිබඳ දත්ත එකතු විය ප්රතිදේහබැක්ටීරියා සහ ඒවාට එරෙහිව විෂ ද්රව්ය,එය P. Ehrlich හට ප්‍රතිශක්තිය පිළිබඳ හාස්‍යජනක න්‍යාය වර්ධනය කිරීමට ඉඩ සලසයි. ෆාගෝසයිටික් සහ හාස්‍යජනක න්‍යායවල ආධාරකරුවන් අතර පසුකාලීන දිගුකාලීන හා ඵලදායි සාකච්ඡාවේදී, ප්‍රතිශක්තිකරණයේ බොහෝ යාන්ත්‍රණ අනාවරණය වූ අතර විද්‍යාව බිහි විය. ප්රතිශක්ති විද්යාව.

ප්‍රවේණික සහ අත්පත් කරගත් ප්‍රතිශක්තිය ප්‍රධාන පද්ධති පහක සම්බන්ධීකරණ ක්‍රියාකාරකම් මත රඳා පවතින බව පසුව සොයා ගන්නා ලදී: macrophages, complement, T- සහ B-lymphocytes, interferons, ප්‍රධාන histocompatibility පද්ධතිය, ප්‍රතිශක්තිකරණ ප්‍රතිචාරයේ විවිධ ආකාර සපයයි. I.I. Mechnikov සහ P. Erlich 1908 දී. නොබෙල් ත්‍යාගය පිරිනමන ලදී.

1892 පෙබරවාරි 12 රුසියානු විද්‍යා ඇකඩමියේ රැස්වීමකදී ඩීඅයි ඉවානොව්ස්කි වාර්තා කළේ දුම්කොළ මොසෙයික් රෝගයට හේතු කාරකය පෙරීම කළ හැකි වෛරසයක් බවයි. මෙම දිනය උපන් දිනයක් ලෙස සැලකිය හැකිය වෛරස් විද්යාව, සහ D.I. Ivanovsky එහි නිර්මාතෘ වේ. පසුව, වෛරස් ශාකවල පමණක් නොව මිනිසුන්, සතුන් සහ බැක්ටීරියා වල පවා රෝග ඇති කරන බව පෙනී ගියේය. කෙසේ වෙතත්, ජානයේ ස්වභාවය සහ ජාන කේතය ස්ථාපිත කිරීමෙන් පසුව පමණක් වෛරස් ජීව ස්වභාවය ලෙස වර්ගීකරණය කරන ලදී.

5. ක්ෂුද්‍රජීව විද්‍යාවේ වර්ධනයේ මීළඟ වැදගත් අදියර විය ප්රතිජීවක සොයා ගැනීම. 1929 දී A. ෆ්ලෙමින් විසින් පෙනිසිලින් සොයා ගත් අතර ප්‍රතිජීවක ප්‍රතිකාර යුගය ආරම්භ වූ අතර, එය වෛද්‍ය විද්‍යාවේ විප්ලවීය ප්‍රගතියකට මග පෑදීය. ක්ෂුද්‍ර ජීවීන් ප්‍රතිජීවක වලට අනුවර්තනය වන බව පසුව පෙනී ගිය අතර, ඖෂධ ප්‍රතිරෝධයේ යාන්ත්‍රණයන් අධ්‍යයනය කිරීමෙන් තත්පරයක් සොයා ගැනීමට හේතු විය. බාහිර වර්ණදේහ (ප්ලාස්මිඩ්) ජෙනෝමයබැක්ටීරියා.

පාඩම් කරනවා ප්ලාස්මිඩ්ඒවා වෛරස් වලට වඩා සරලව ව්‍යුහගත ජීවීන් බව පෙන්නුම් කරයි, සහ මෙන් නොව බැක්ටීරියාභක්ෂකබැක්ටීරියාවට හානි නොකරන්න, නමුත් ඒවාට අතිරේක ජීව විද්යාත්මක ගුණාංග ලබා දෙන්න. ප්ලාස්මිඩ සොයා ගැනීම ජීවයේ පැවැත්මේ ස්වරූපයන් සහ එහි පරිණාමයේ විය හැකි මාර්ග පිළිබඳ අවබෝධය සැලකිය යුතු ලෙස පුළුල් කර ඇත.

6. නවීන අණුක ජානමය අදියරක්ෂුද්‍රජීව විද්‍යාව, වෛරස් විද්‍යාව සහ ප්‍රතිශක්ති විද්‍යාව සංවර්ධනය කිරීම 20 වන සියවසේ දෙවන භාගයේදී ජාන විද්‍යාව සහ අණුක ජීව විද්‍යාවේ ජයග්‍රහණ සහ ඉලෙක්ට්‍රෝන අන්වීක්ෂය නිර්මාණය කිරීම ආරම්භ විය.

බැක්ටීරියාව පිළිබඳ අත්හදා බැලීම් මගින් පාරම්පරික ගති ලක්ෂණ සම්ප්රේෂණය කිරීමේදී DNA වල කාර්යභාරය ඔප්පු කර ඇත. බැක්ටීරියා, වෛරස් සහ පසුකාලීන ප්ලාස්මිඩ අණුක ජීව විද්‍යාවේ සහ ජාන පර්යේෂණයේ වස්තු ලෙස භාවිතා කිරීම ජීවයට යටින් පවතින මූලික ක්‍රියාවලීන් පිළිබඳ ගැඹුරු අවබෝධයක් ලබා ගැනීමට හේතු වී තිබේ. බැක්ටීරියා DNA වල ප්‍රවේණික තොරතුරු කේතනය කිරීමේ මූලධර්ම පැහැදිලි කිරීම සහ ප්‍රවේණි කේතයේ විශ්වීයත්වය තහවුරු කිරීම මගින් වඩාත් සංවිධිත ජීවීන්ගේ ලක්ෂණ අණුක ජාන රටා වඩා හොඳින් අවබෝධ කර ගැනීමට හැකි විය.

Escherichia coli වල ජෙනෝමය විකේතනය කිරීමෙන් ජාන සැලසුම් කිරීමට සහ බද්ධ කිරීමට හැකි වී ඇත. මේ වෙනකොට ජාන ඉංජිනේරු විද්යාවනව දිශාවන් නිර්මාණය කළේය ජෛව තාක්ෂණය.

බොහෝ වෛරස් වල අණුක ජානමය සංවිධානය සහ සෛල සමඟ අන්තර්ක්‍රියා කිරීමේ යාන්ත්‍රණ විකේතනය කර ඇත, වෛරස් DNA වලට සංවේදී සෛලයක ජෙනෝමය සමඟ ඒකාබද්ධ වීමට ඇති හැකියාව සහ වෛරස් පිළිකා කාරකයේ මූලික යාන්ත්‍රණයන් ස්ථාපිත කර ඇත.

ප්‍රතිශක්ති විද්‍යාව අව්‍යාජ විප්ලවයකට භාජනය වී ඇති අතර, එය බෝවන ප්‍රතිශක්ති විද්‍යාවේ විෂය පථයෙන් ඔබ්බට ගොස් වඩාත් වැදගත් මූලික වෛද්‍ය හා ජීව විද්‍යාත්මක විෂයයන්ගෙන් එකක් බවට පත්ව ඇත. අද වන විට, ප්රතිශක්තිකරණය යනු ආසාදනවලින් ආරක්ෂා වීම පමණක් නොව අධ්යයනය කරන විද්යාවකි. නූතන අර්ථයෙන් ප්‍රතිශක්ති විද්‍යාව යනු ශරීරයේ ව්‍යුහාත්මක හා ක්‍රියාකාරී අඛණ්ඩතාව පවත්වා ගනිමින් ජානමය වශයෙන් විදේශීය සෑම දෙයකින්ම ශරීරයේ ස්වයං-ආරක්ෂාව පිළිබඳ යාන්ත්‍රණ අධ්‍යයනය කරන විද්‍යාවකි.

ප්‍රතිශක්ති විද්‍යාවට දැනට විශේෂිත ක්ෂේත්‍ර ගණනාවක් ඇතුළත් වන අතර, ඒවා අතර, බෝවන ප්‍රතිශක්ති විද්‍යාව සමඟ, වඩාත් වැදගත් වන්නේ ප්‍රතිශක්තිකරණ, ප්‍රතිශක්තිකරණ, බද්ධ කිරීමේ ප්‍රතිශක්ති විද්‍යාව, ප්‍රතිශක්ති ව්‍යාධි විද්‍යාව, ප්‍රතිශක්තිකරණ රෝග විද්‍යාව, ඔන්කොයිමියුනොලොජි, ඔන්ටොජෙනසිස් ප්‍රතිශක්ති විද්‍යාව, එන්නත් විද්‍යාව සහ ව්‍යවහාරික ප්‍රතිශක්තිකරණ රෝග විනිශ්චය ය.

ක්ෂුද්‍රජීව විද්‍යාව සහ වෛරස් විද්‍යාව ලෙස මූලික ජීව විද්‍යාවඔවුන්ගේම අරමුණු සහ අරමුණු සහිත ස්වාධීන විද්‍යාත්මක විෂයයන් ගණනාවක් ද ඇතුළත් වේ: සාමාන්‍ය, තාක්ෂණික (කාර්මික), කෘෂිකාර්මික, පශු වෛද්‍ය සහ මනුෂ්‍යත්වය සඳහා ඉතා වැදගත් ඒවා වෛද්ය ක්ෂුද්ර ජීව විද්යාව සහ වෛරස් විද්යාව.

වෛද්‍ය ක්ෂුද්‍රජීව විද්‍යාව සහ වෛරස් විද්‍යාව මගින් මානව බෝවෙන රෝග (ඒවායේ රූප විද්‍යාව, කායික විද්‍යාව, පරිසර විද්‍යාව, ජීව විද්‍යාත්මක හා ජානමය ලක්ෂණ) රෝග කාරක අධ්‍යයනය කරයි, ඒවා වගා කිරීම සහ හඳුනා ගැනීම සඳහා ක්‍රම, ඒවායේ රෝග විනිශ්චය, ප්‍රතිකාර සහ වැළැක්වීම සඳහා නිශ්චිත ක්‍රම සංවර්ධනය කරයි.