Արյան կարմիր բջիջներ. գործառույթներ, արյան քանակի նորմեր, շեղումների պատճառներ. Գիտության և կրթության ժամանակակից հիմնախնդիրները Կարբոնահիդրազի ֆունկցիաները

Աշխատանքի նպատակն է որոշել արու առնետների վերարտադրողական համակարգում ցինկ պարունակող կարբոնահիդրազի ակտիվության վրա ազդող գործոնները ցածր ինտենսիվության միկրոալիքային ճառագայթման ազդեցության պայմաններում: Ածխածնի անհիդրազը կարևոր դեր է խաղում սերմնահեղուկի պլազմայի և սերմնահեղուկի հասունացման գործընթացում: Կարբոնահիդրազի ակտիվությունը վերահսկիչ խմբի էպիդիդիմիսի և առնետների ջրային աղի քաղվածքներում, ըստ մեր տվյալների, տատանվում է 84,0 ± 74,5 U/ml-ից, որը հյուսվածքների քաշի առումով կազմում է 336,0 ± 298,0 U/mg: Ուսումնասիրվել է ցինկի և պոլիամինային իոնների կոնցենտրացիայի և ածխածնի անհիդրազի ակտիվության միջև կապը: Արու առնետների վերարտադրողական համակարգում ածխածնի անհիդրազի ակտիվությունն ունի կարգավորման բարդ սխեման, որն ակնհայտորեն չի սահմանափակվում մեր նկարագրած գործոններով։ Ստացված արդյունքների հիման վրա կարելի է եզրակացնել, որ այս ֆերմենտի ակտիվության տարբեր կարգավորիչների դերը տատանվում է՝ կախված կարբոնախիդրազի ակտիվության աստիճանից։ Հավանական է, որ սպերմինի բարձր կոնցենտրացիաները սահմանափակում են ածխածնի անհիդրազի գենի տրանսկրիպցիան՝ հաշվի առնելով այս պոլիամինի գործառույթների մասին տվյալները: Սպերմիդինը, հավանաբար, ծառայում է որպես սահմանափակող գործոն կարբոնանջիդրազի ակտիվության կարգավորման հետտրիբոսոմային փուլերում, իսկ պուտրեսինը և ցինկի իոնների կոնցենտրացիան փոխկապակցված ակտիվացման գործոններ են:

արու առնետների վերարտադրողական համակարգ

ցինկի իոնի կոնցենտրացիան

պոլիամիններ

ածխածնային անհիդրազ

1. Բոյկո Օ.Վ. Ուրոպաթոգեն միկրոֆլորայի նույնականացման համար աղաթթվի սպերմինի և սպերմիդինի օգտագործման մեթոդաբանական ասպեկտները / O.V. Բոյկոն, Ա.Ա. Տերենտյևը, Ա.Ա. Նիկոլաև // Վերարտադրության խնդիրներ. – 2010. – No 3. – P. 77-79.

2. Իլյինա Օ.Ս. I տիպի շաքարային դիաբետի դեպքում մարդու արյան մեջ ցինկի պարունակության փոփոխությունները և ցինկ պարունակող ինսուլին-քոնդրոյտին սուլֆատ համալիրի հիպոգլիկեմիկ ազդեցության առանձնահատկությունները. դիս. ...քենթ. կենսաբան. Գիտ. – Ուֆա, 2012. – 24 էջ.

3. Լուցկի Դ.Լ. Տարբեր պտղաբերության սերմնաժայթքների սպիտակուցային սպեկտր / D.L. Լուցկի, Ա.Ա. Նիկոլաև, Լ.Վ. Լոժկինա // Ուրոլոգիա. – 1998. – No 2. – P. 48-52:

4. Նիկոլաեւ Ա.Ա. Սպերմոպլազմիկ ֆերմենտների ակտիվությունը տարբեր պտղաբերության սերմնաժայթքումներում / Ա.Ա. Նիկոլաևը, Դ.Լ. Լուցկի, Վ.Ա. Բոչանովսկին, Լ.Վ. Լոժկինա // Ուրոլոգիա. – 1997. – No 5. – P. 35:

5. Պլոսկոնոս Մ.Վ. Պոլիամինների որոշում տարբեր կենսաբանական օբյեկտներում / Մ.Վ. Պլոսկոնոս, Ա.Ա. Նիկոլաև, Ա.Ա. Նիկոլաև // Աստրախանի նահանգ. մեղր. ակադ. – Աստրախան, 2007. – 118 էջ.

6. Պոլունին Ա.Ի. Ցինկի օգտագործումը տղամարդկանց անպտղության բուժման մեջ / A.I. Պոլունինը, Վ.Մ. Միրոշնիկով, Ա.Ա. Նիկոլաև, Վ.Վ. Դումչենկոն, Դ.Լ. Լուցկի // Միկրոտարրեր բժշկության մեջ. – 2001. – T. 2. – No 4. – P. 44-46.

7. Haggis G.C., Gortos K. Արու առնետների վերարտադրողական տրակտի հյուսվածքների կարբոն անհիդրազի ակտիվությունը և դրա կապը սերմնարտադրության հետ // J. Fert. Վերարտադրել. – 2014. - V. 103. - P. 125-130.

Հայտնի է, որ արու թռչունների, կաթնասունների և մարդկանց վերարտադրողական համակարգում բարձր է ցինկ պարունակող կարբոնահիդրազի ակտիվությունը։ Այս ֆերմենտի ակտիվությունը ազդում է սերմնահեղուկի հասունացման, դրանց քանակի և սերմի ծավալի վրա։ Բայց չկա տեղեկատվություն ածխածնի անհիդրազի ակտիվության փոփոխությունների մասին վերարտադրողական համակարգի այլ մշտական ​​բաղադրիչների ազդեցության տակ, ինչպիսիք են ցինկի իոնները և պոլիամինները (putrescine, spermine և spermidine), որոնք ակտիվորեն ազդում են սպերմատոգենեզի վրա: Տրված է միայն արական առնետների վերարտադրողական համակարգի օրգանների մորֆոֆունկցիոնալ վիճակի, սերմնաբջիջների քանակի և շարժունակության վրա կարբոնանհիդրազի ակտիվության փոփոխությունների հետևանքների ընդհանուր նկարագրությունը։

Մեր աշխատանքի նպատակըուսումնասիրում էր ցինկ պարունակող կարբոնախիդրազի ակտիվությունը և դրա կապը սեռական հասուն արու առնետների վերարտադրողական համակարգի հյուսվածքում պոլիամինների և ցինկի իոնների մակարդակի հետ:

նյութեր եւ մեթոդներ. Հետազոտության փորձարարական մասը ներառում էր 418 արու սպիտակ առնետ Wistar: Առնետները եղել են 6-7 ամսական (հասուն անհատներ): Առնետների մարմնի քաշը եղել է 180-240 գ՝ պահված վիվարիումի ստանդարտ պայմաններում։ Փորձարարական ազդեցությունների արձագանքների սեզոնային տարբերությունների ազդեցությունից խուսափելու համար բոլոր ուսումնասիրություններն իրականացվել են տարվա աշուն-ձմեռ ժամանակահատվածում: Առնետներից ամորձիների և էպիդիդիմիսի հավաքումն իրականացվել է եթերային անզգայացման պայմաններում (փորձարարական ուսումնասիրություններն իրականացվել են կենդանիների նկատմամբ մարդասիրական վերաբերմունքի Հելսինկյան հռչակագրի խիստ համաձայն):

Մեր ուսումնասիրության առարկաներն էին էպիդիդիմիսի և սեռական հասուն սպիտակ առնետների ամորձիների ջրային աղի քաղվածքները: Էքստրակտները պատրաստվել են տրիս-հիդրոքլորաթթվի բուֆերային pH = 7,6 1/5 քաշային/ծավալ հարաբերակցությամբ, չորս անգամ սառչելուց, հալվելուց և ցենտրիֆուգումից հետո 8000 գ 50 րոպե տեւողությամբ, նմուշները սառեցվել և պահվել են -24 °C ջերմաստիճանում մինչև ուսումնասիրությունը։

Ցինկի որոշում. Ուսումնասիրվող էքստրակտի 2 մլ-ին ավելացվել է 0,1 մլ 10% NaOH և 0,2 մլ դիթիզոնի 1% լուծույթ ածխածնի քառաքլորիդում: Բացասական կոնտրոլում ավելացվել է 2 մլ թորած ջուր, դրական հսկողության մեջ՝ 20 մկմոլ ցինկի սուլֆատի լուծույթ (ցինկի սուլֆատի ստանդարտ լուծույթի մոլային կոնցենտրացիան)։ Նմուշները լուսանկարվել են 535 նմ-ով: Նմուշում ցինկի կատիոնների կոնցենտրացիան հաշվարկվել է բանաձևով. OD535 Ստանդարտ - ցինկի սուլֆատի ստանդարտ 20 միկրոմոլային լուծույթի օպտիկական խտություն, որը չափվում է 535 նմ:

Ածխածնի անհիդրազի որոշում. Մեթոդը հիմնված է բիկարբոնատների ջրազրկման ռեակցիայի վրա՝ ջրազրկման արդյունքում ձևավորված ածխաթթու գազի հեռացմամբ՝ ռեակցիայի միջավայրի ինտենսիվ փրփրելով ածխածնի օքսիդից ազատված օդով և pH-ի փոփոխության արագության միաժամանակյա գրանցմամբ։ Ռեակցիան սկսվում է փորձարկման նմուշը պարունակող ռեակցիայի խառնուրդի մեջ արագ ներմուծելով ենթաշերտի լուծույթ՝ նատրիումի բիկարբոնատ (10 մՄ): Այս դեպքում pH-ն ավելանում է 0,01-0,05 միավորով։ Սեռական հասուն սպիտակ առնետների էպիդիդիմիսի և ամորձիների նմուշները (10,0-50,0 մգ) համասեռացվեցին և ցենտրիֆուգվեցին 4500 գ 30 րոպեի ընթացքում: 4 °C-ում, իսկ վերին նյութը նոսրացվում է կրկնակի թորած ջրով 4 °C-ում մինչև այնպիսի ծավալ, որը թույլ կտա չափել ռեակցիայի ժամանակը: Ածխածնի անհիդրազի ակտիվությունը որոշվում է սկզբնական pH արժեքի փոփոխությամբ 8,2-ից 8,7 CO2-ի ջրազրկման ռեակցիայում: Հիդրօքսիլ իոնների կուտակման արագությունը չափվում է էլեկտրաչափական եղանակով՝ օգտագործելով զգայուն ծրագրավորվող pH մետր (InoLab pH 7310), որը միացված է ԱՀ-ին: 8.2-ից 8.7 pH-ի անցումը գծային հատվածում ժամանակի հետ կապված հաշվի է առնում ֆերմենտի ակտիվությունը: Հաշվարկվել է միջին ժամանակը (T) 4 չափումների համար: Որպես հսկողություն վերցվել է pH-ի փոփոխության ժամանակը առանց նմուշի միջավայրում CO2-ի ինքնաբուխ խոնավացման ժամանակ: Կարբոնախիդրազի ակտիվությունը արտահայտվել է ֆերմենտային միավորներով (U) մեկ մգ թաց հյուսվածքի համար՝ համաձայն հավասարման. 4 մլ սառեցված, հագեցած ածխածնի երկօքսիդի, երկթորած ջրի մաքուր լուծույթ:

Պոլիամինների որոշում. Հասուն արու ալբինոս առնետների էպիդիդիմիսի և ամորձիների նմուշները (100–200 մգ) համասեռացվեցին, կասեցվեցին 1 մլ 0,2 նորմալ պերքլորաթթվի մեջ՝ ազատ պոլիամիններ հանելու համար և ցենտրիֆուգվեցին։ 100 մկլ վերին նյութին ավելացվել է 110 մկլ 1,5 մ նատրիումի կարբոնատ և 200 մկլ դանսիլ քլորիդ (7,5 մգ/մլ լուծույթ ացետոնի մեջ; Սիգմա, Մյունխեն, Գերմանիա): Բացի այդ, որպես ներքին ստանդարտ ավելացվել է 10 μL 0,5 մՄ դիամինոհեքսան: 1 ժ ինկուբացիայից հետո 60°C մթության մեջ, 50 μL պրոլինի լուծույթ (100 mg/mL) ավելացվել է ազատ դանսիլ քլորիդը կապելու համար: Այնուհետև պոլիամինների դանսիլ ածանցյալները (այսուհետ՝ DNSC-պոլիամիններ) արդյունահանվել են տոլուոլով, սուբլիմացվել վակուումային գոլորշիչով և լուծվել մեթանոլում: Քրոմատագրությունը կատարվել է հակադարձ փուլային LC 18 սյունակի վրա (Supelco), բարձր արդյունավետության հեղուկ քրոմատոգրաֆիայի համակարգում (Dionex), որը բաղկացած է գրադիենտ խառնիչից (մոդել P 580), ավտոմատ ներարկիչից (ASI 100) և լյումինեսցենտային դետեկտորից (RF 2000) . Պոլիամինները զտվել են 70%-ից մինչև 100% (v/v) մեթանոլի գծային գրադիենտով ջրի մեջ 1 մլ/րոպե հոսքի արագությամբ և հայտնաբերվել 365 nm գրգռման ալիքի երկարության և 510 nm արտանետման ալիքի երկարության դեպքում: Տվյալները վերլուծվել են Dionex Chromeleon ծրագրաշարի միջոցով և քանակականացումն իրականացվել է մաքուր նյութերի խառնուրդից ստացված չափաբերման կորերով (Նկար Ա):

DNSC պոլիամինների բարձր արդյունավետության քրոմատոգրաֆիա.

A - DNSC-պոլիամինների ստանդարտ խառնուրդի քրոմատոգրամ; B - DNSC-պոլիամինների քրոմատոգրամ՝ էպիդիդիմիսի և արու առնետների ամորձիների հյուսվածքային նմուշներից մեկից: 1 - putrescine; 2 - cadaverine; 3 - hexanediamine (ներքին ստանդարտ); 4 - սպերմիդին; 5 - սերմի. X-առանցքը ժամանակն է րոպեներով, y առանցքը ֆլյուորեսցենտություն է: Անհամար գագաթներ - չբացահայտված կեղտեր

Հետազոտության արդյունքներ և քննարկում. Ինչպես հայտնի է, ածխածնի անհիդրազը կարևոր դեր է խաղում սերմնահեղուկի պլազմայի նյութափոխանակության և սերմնահեղուկի հասունացման գործում։ Կարբոնահիդրազի ակտիվությունը վերահսկիչ խմբի էպիդիդիմիսի և առնետների ջրային աղի քաղվածքներում, ըստ մեր տվյալների, տատանվում է 84,0 ± 74,5 U/ml-ից, որը հյուսվածքների քաշի առումով կազմում է 336,0 ± 298,0 U/mg: Ֆերմենտի նման բարձր ակտիվությունը կարելի է բացատրել նրա կարեւոր ֆիզիոլոգիական դերով։ Համեմատության համար նշենք, որ այս ֆերմենտի ակտիվության մակարդակը նույն կենդանիների այլ հյուսվածքներում շատ ավելի ցածր է (Աղյուսակ 1), բացառությամբ ամբողջական արյան, որում հայտնի է էրիթրոցիտային կարբոնանհիդրազի բարձր ակտիվություն: Այնուամենայնիվ, ուշագրավ է էպիդիդիմիսներում և ամորձիներում ածխածնի անհիդրազի ակտիվության արժեքների շատ լայն ցրումը, որի տատանումների գործակիցը ավելի քան 150% է (Աղյուսակ 1):

Աղյուսակ 1

Սեռական հասուն տղամարդկանց հյուսվածքներում ածխածնային անհիդրազի ակտիվությունը

Սա ցույց է տալիս չհաշվառված գործոնների ազդեցությունը ֆերմենտի ակտիվության վրա: Այս հատկանիշը բացատրող երկու հանգամանք կա. Նախ, հայտնի է, որ կենսաբանորեն ակտիվ ամինները, ներառյալ պոլիամինները, սպերմիդինը և սպերմինը, կարող են ակտիվացնել ածխածնի անհիդրազը: Հենց տղամարդու վերարտադրողական համակարգն է սպերմինի և սպերմիդինի ամենահարուստ աղբյուրը: Հետևաբար, մենք զուգահեռաբար որոշել ենք պոլիամինների կոնցենտրացիան էպիդիդիմիսի և արու առնետների ամորձիների ջրային աղի քաղվածքներում: Պոլիամինները սպերմիդինը, սպերմինը և պուտրեսինը վերլուծվել են HPLC-ով, ինչպես նկարագրված է «Մեթոդներ»-ում: Ցույց է տրվել, որ արու առնետների էպիդիդիմիսի և ամորձիների հյուսվածքում հայտնաբերվել են սպերմին, սպերմիդին և պուտրեսցին (նկ. Բ):

Առողջ սեռական հասուն արու առնետների մոտ սպերմինի մակարդակը կազմել է 5,962±4,0,91 մկգ/գ հյուսվածք, սպերմիդինը՝ 3,037±3,32 մկգ/գ, պուտրեսինը՝ 2,678±1,82 մկգ/գ հյուսվածք, իսկ սպերմինը/գ/գ հյուսվածքը՝ .29,8 մկգ/սպերմիդին: Ընդ որում, մեր տվյալներով, թե՛ սպերմիդինի մակարդակը, թե՛ սպերմինի մակարդակը (ավելի քիչ չափով) ենթարկվում են զգալի տատանումների։ Հարաբերակցության վերլուծությունը ցույց տվեց զգալի դրական կապ (r=+0,3) սպերմինի և սպերմիդինի և, համապատասխանաբար, սպերմիդինի և պուտրեսինի (r=+0,42) մակարդակների միջև: Ըստ երևույթին, այս հանգամանքը կարբոնահիդրազային ակտիվության որոշման արդյունքների բարձր դիսպերսիայի վրա ազդող գործոններից է։

Կարբոնանհիդրազի ակտիվության մեկ այլ կարգավորիչ կարող է լինել ցինկի մակարդակը սեռական հասուն արու առնետների վերարտադրողական հյուսվածքում: Ըստ մեր տվյալների՝ ցինկի իոնի մակարդակը շատ է տատանվում՝ սեռական հասուն արու առնետների ամորձիների և էպիդիդիմիսի ընդհանուր պատրաստման հյուսվածքի 3,2-ից մինչև 36,7 մկգ/գ:

Ցինկի մակարդակների փոխկապակցված վերլուծությունը սպերմինի, սպերմիդինի և կարբոնահիդրազի ակտիվության մակարդակների հետ ցույց տվեց դրական հարաբերակցության տարբեր մակարդակներ ցինկի իոնների և այս մետաբոլիտների կոնցենտրացիայի միջև: Սպերմինի հետ կապի աննշան մակարդակ է հայտնաբերվել (+0,14): Հաշվի առնելով օգտագործված դիտարկումների քանակը, այս հարաբերակցությունը նշանակալի չէ (p≥0.1): Զգալի դրական հարաբերակցություն է հայտնաբերվել ցինկի իոնների մակարդակի և պուտրեսինի կոնցենտրացիայի (+0,42) և սպերմիդինի (+0,39) կոնցենտրացիայի միջև։ Հայտնաբերվել է նաև ակնկալվող բարձր դրական հարաբերակցություն (+0,63) ցինկի իոնների կոնցենտրացիայի և ածխաջրածնային անհիդրազի ակտիվության միջև:

Հաջորդ փուլում մենք փորձեցինք համատեղել ցինկի կոնցենտրացիան և պոլիամինների մակարդակը՝ որպես ածխաթթվային անհիդրազի ակտիվությունը կարգավորող գործոններ։ Ցինկի իոնների, պոլիամինների և կարբոնահիդրազի ակտիվության կոնցենտրացիայի համատեղ որոշման վարիացիոն շարքը վերլուծելիս որոշ օրինաչափություններ են հայտնաբերվել։ Ցույց է տրվել, որ ածխածնի անհիդրազի ակտիվության մակարդակի վերաբերյալ անցկացված 69 ուսումնասիրություններից կարելի է առանձնացնել երեք խումբ.

Խումբ 1 - բարձր ակտիվություն 435-ից մինչև 372 միավոր (դիտարկումների քանակը 37),

Խումբ 2 - ցածր ակտիվություն 291-ից մինչև 216 միավոր (դիտարկումների քանակը 17),

Խումբ 3 - շատ ցածր ակտիվություն 177-ից մինչև 143 միավոր (դիտարկումների քանակը 15):

Այս խմբերի հետ պոլիամինների մակարդակները և ցինկի իոնների կոնցենտրացիան դասակարգելիս բացահայտվեց մի հետաքրքիր առանձնահատկություն, որը չէր երևում վարիացիոն շարքը վերլուծելիս: Սպերմինի առավելագույն կոնցենտրացիաները (միջինում 9,881±0,647 մկգ/գ հյուսվածք) կապված են ածխածնի անհիդրազի շատ ցածր ակտիվությամբ երրորդ խմբի դիտարկումների հետ, իսկ նվազագույնը (միջինում 2,615±1,130 մկգ/գ հյուսվածք) երկրորդ խմբի հետ՝ ցածր ֆերմենտային ակտիվություն.

Դիտարկումների ամենամեծ քանակը կապված է այս խմբում ածխածնի անհիդրազի ակտիվության բարձր մակարդակով առաջին խմբի հետ, սպերմի կոնցենտրացիաները մոտ են միջին արժեքներին (միջինում 4,675 ± 0,725 մկգ/գ հյուսվածք):

Ցինկի իոնների կոնցենտրացիան բարդ կապ է ցուցադրում ածխածնի անհիդրազի ակտիվության հետ։ Ածխածնի անհիդրազի ակտիվության առաջին խմբում (Աղյուսակ 2) ցինկի իոնների կոնցենտրացիան նույնպես ավելի բարձր է, քան մյուս խմբերի արժեքները (միջինում 14,11±7,25 մկգ/գ հյուսվածք): Այնուհետև, ցինկի իոնների կոնցենտրացիան նվազում է ածխածնի անհիդրազի ակտիվության նվազմանը համապատասխան, բայց այս նվազումը համաչափ չէ: Եթե ​​երկրորդ խմբում ածխածնի անհիդրազի ակտիվությունը առաջինի համեմատ նվազում է 49,6%-ով, իսկ երրորդում՝ 60,35%-ով, ապա ցինկի իոնների կոնցենտրացիան երկրորդ խմբում նվազում է 23%-ով, իսկ երրորդում՝ 39%-ով։

աղյուսակ 2

Պոլիամինների և ցինկի իոնների կոնցենտրացիայի և ածխածնի անհիդրազի ակտիվության միջև կապը

Սա վկայում է այս ֆերմենտի գործունեության վրա ազդող լրացուցիչ գործոնների մասին։ Պուտրեսինի կոնցենտրացիայի դինամիկան փոքր-ինչ տարբեր է թվում (Աղյուսակ 2): Այս պոլիամինի մակարդակը նվազում է ավելի արագ տեմպերով, իսկ երրորդ համեմատական ​​խմբում պուտրեսինի մակարդակը միջինում ցածր է գրեթե 74%-ով։ Սպերմիդինի մակարդակների դինամիկան տարբերվում է նրանով, որ այս պոլիամինի «ծածկվող» կոնցենտրացիայի արժեքները հիմնականում կապված են կարբոն անհիդրազի ակտիվության մակարդակների երկրորդ խմբի հետ: Այս ֆերմենտի բարձր ակտիվությամբ (1-ին խումբ) սպերմիդինի կոնցենտրացիան մի փոքր ավելի բարձր է, քան միջինը բոլոր դիտարկումների համար, իսկ երրորդ խմբում այն ​​գրեթե 4 անգամ ցածր է, քան երկրորդ խմբի կոնցենտրացիան:

Այսպիսով, ածխածնի անհիդրազի ակտիվությունը արու առնետների վերարտադրողական համակարգում ունի կարգավորման բարդ սխեմա, որն ակնհայտորեն չի սահմանափակվում մեր նկարագրած գործոններով։ Ստացված արդյունքների հիման վրա կարելի է եզրակացնել, որ այս ֆերմենտի ակտիվության տարբեր կարգավորիչների դերը տատանվում է՝ կախված կարբոնախիդրազի ակտիվության աստիճանից։ Հավանական է, որ սպերմինի բարձր կոնցենտրացիաները սահմանափակում են ածխածնի անհիդրազի գենի տրանսկրիպցիան՝ հաշվի առնելով այս պոլիամինի գործառույթների մասին տվյալները: Սպերմիդինը, հավանաբար, ծառայում է որպես սահմանափակող գործոն կարբոնանջիդրազի ակտիվության կարգավորման հետտրիբոսոմային փուլերում, իսկ պուտրեսինը և ցինկի իոնների կոնցենտրացիան փոխկապակցված ակտիվացման գործոններ են:

Այս պայմաններում արտաքին գործոնների (այդ թվում՝ վերարտադրողական ֆունկցիան փոփոխող) ազդեցության գնահատումը ածխաթթվային անհիդրազի՝ որպես արու կաթնասունների վերարտադրողական համակարգի նյութափոխանակության կարևոր օղակներից մեկի վրա, դառնում է ոչ միայն կարևոր, այլև բավականին կարևոր: բարդ գործընթաց, որը պահանջում է մեծ թվով վերահսկողություն և բազմակողմ գնահատում:

Մատենագիտական ​​հղում

Ձեր ուշադրությանն ենք ներկայացնում «Բնական գիտությունների ակադեմիա» հրատարակչության կողմից հրատարակված ամսագրերը.

Որոնք, պարադոքսալ կերպով, ինքնուրույն չեն օգտագործվում որպես diuretics (diuretics): Գլաուկոմայի դեպքում հիմնականում օգտագործվում են ածխածնային անհիդրազի ինհիբիտորները:

Նեֆրոնի պրոքսիմալ խողովակների էպիթելիում ածխածնային անհիդրազը կատալիզացնում է ածխաթթվի ջրազրկումը, որը բիկարբոնատների վերաներծծման հիմնական օղակն է: Երբ ածխաթթվային անհիդրազի ինհիբիտորները գործում են, նատրիումի բիկարբոնատը չի վերաներծծվում, այլ արտազատվում է մեզի մեջ (միզը դառնում է ալկալային): Նատրիումից հետո կալիումը և ջուրը օրգանիզմից արտազատվում են մեզի միջոցով: Այս խմբի նյութերի միզամուղ ազդեցությունը թույլ է, քանի որ պրոքսիմալ խողովակներում մեզի մեջ արտազատվող գրեթե ամբողջ նատրիումը պահպանվում է նեֆրոնի հեռավոր մասերում: Ահա թե ինչու Կարբոնային անհիդրազի ինհիբիտորները ներկայումս ինքնուրույն չեն օգտագործվում որպես միզամուղներ:.

Կարբոնային անհիդրազի արգելակող դեղամիջոցներ

Ացետազոլամիդ

(diacarb) այս խմբի միզամուղների ամենահայտնի ներկայացուցիչն է։ Այն լավ ներծծվում է աղեստամոքսային տրակտից և, անփոփոխ, արագ արտազատվում է մեզով (այսինքն՝ դրա ազդեցությունը կարճատև է)։ Աացետազոլամիդի նման դեղամիջոցներ. դիքլորֆենամիդ(դարանիդ) և մետազոլամիդ(նեպտազան):

Մետազոլամիդնույնպես պատկանում է ածխածնի անհիդրազի ինհիբիտորների դասին։ Ունի ավելի երկար կիսամյակ, քան ացետազոլամիդը և ավելի քիչ նեֆրոտոքսիկ է:

Դորզոլամիդ. Ցուցված է բարձր ներակնային ճնշման նվազեցման համար բաց անկյունային գլաուկոմայով կամ աչքի հիպերտոնիկ հիվանդների մոտ, ովքեր անբավարար են արձագանքում բետա-բլոկլերներին:

Բրինզոլամիդ(առևտրային անվանումներ Azopt, Alcon Laboratories, Inc., Բեֆարդին Fardi MEDICALS) նույնպես պատկանում է ածխածնի անհիդրազի ինհիբիտորների դասին: Օգտագործվում է ներակնային ճնշումը նվազեցնելու համար բաց անկյունային գլաուկոմայով կամ աչքի հիպերտոնիայով հիվանդների մոտ: Բրինզոլամիդի և թիմոլոլի համադրությունը շուկայում ակտիվորեն օգտագործվում է «Ազարգա» ապրանքային անվանումով։

Կողմնակի ազդեցություն

Կարբոնային անհիդրազի ինհիբիտորներն ունեն հետևյալ հիմնական կողմնակի ազդեցությունները.

• հիպոկալեմիա;
• հիպերքլորեմիկ մետաբոլիկ acidosis;
• ֆոսֆատուրիա;
• հիպերկալցիուրիա երիկամների քարերի առաջացման ռիսկով;
• նեյրոտոքսիկություն (պարեստեզիա և քնկոտություն);
• ալերգիկ ռեակցիաներ.

Հակացուցումներ

Աացետազոլամիդը, ինչպես և այլ կարբոնախիդրազի ինհիբիտորները, հակացուցված է լյարդի ցիռոզի դեպքում, քանի որ մեզի ալկալիզացումը կանխում է ամոնիակի արտազատումը, ինչը հանգեցնում է էնցեֆալոպաթիայի:

Օգտագործման ցուցումներ

Կարբոնային անհիդրազի ինհիբիտորները հիմնականում օգտագործվում են գլաուկոմայի բուժման համար: Դրանք կարող են օգտագործվել նաև էպիլեպսիայի և լեռնային սուր հիվանդության բուժման համար: Քանի որ դրանք նպաստում են միզաթթվի տարրալուծմանը և վերացմանը, դրանք կարող են օգտագործվել հոդատապի բուժման համար:

Ացետազոլամիդօգտագործվում է հետևյալ պայմաններում.

• Գլաուկոմա (նվազեցնում է ներակնային հեղուկի արտադրությունը թարթիչային մարմնի քորոիդային պլեքսուսի կողմից։
• Էպիլեպսիայի բուժում (Petit mal). Ացետազոլամիդն արդյունավետ է նոպաների շատ տեսակների բուժման համար, ներառյալ տոնիկ-կլոնիկ և բացակայող նոպաները, թեև այն ունի սահմանափակ օգուտ, քանի որ հանդուրժողականությունը զարգանում է երկարատև օգտագործման դեպքում:
• Բուժման ընթացքում նեֆրոպաթիայի կանխարգելման համար, քանի որ բջիջների քայքայումից ազատվում են մեծ քանակությամբ պուրինային հիմքեր, որոնք ապահովում են միզաթթվի սինթեզի կտրուկ աճ: Բիկարբոնատների արտազատման պատճառով մեզի ալկալիզացումը ացետազոլամիդով արգելակում է նեֆրոպաթիան՝ միզաթթվի բյուրեղների կորստի պատճառով:
• Ուռուցքի ժամանակ դիուրեզը բարձրացնելու և CHF-ում մետաբոլիկ հիպոքլորեմիկ ալկալոզը շտկելու համար: Նվազեցնելով NaCl-ի և բիկարբոնատների ռեաբսորբցիան ​​պրոքսիմալ խողովակներում:

Այնուամենայնիվ, այս ցուցումներից և ոչ մեկի համար ացետազոլամիդը առաջնային դեղաբանական բուժում չէ (ընտրության դեղամիջոց): Ացետազոլամիդը նշանակվում է նաև լեռնային հիվանդության դեպքում (քանի որ այն առաջացնում է ացիդոզ, որը հանգեցնում է շնչառական կենտրոնի զգայունության վերականգնմանը հիպոքսիայի նկատմամբ):

Կարբոնային անհիդրազի ինհիբիտորներ լեռնային հիվանդության բուժման մեջ

Բարձր բարձրությունների վրա թթվածնի մասնակի ճնշումն ավելի ցածր է, և մարդիկ պետք է ավելի արագ շնչեն, որպեսզի բավարար թթվածին ստանան ապրելու համար: Երբ դա տեղի է ունենում, թոքերում ածխածնի երկօքսիդի CO2 մասնակի ճնշումը նվազում է (ուղղակի դուրս է մղվում արտաշնչելիս), ինչի հետևանքով առաջանում է շնչառական ալկալոզ: Այս գործընթացը սովորաբար փոխհատուցվում է երիկամների կողմից բիկարբոնատների արտազատման միջոցով և դրանով իսկ առաջացնում է փոխհատուցվող մետաբոլիկ acidosis, սակայն այս մեխանիզմը տևում է մի քանի օր:

Ավելի անհապաղ բուժումը ածխաթթվային անհիդրազի ինհիբիտորներն են, որոնք կանխում են բիկարբոնատների կլանումը երիկամներում և օգնում են ուղղել ալկալոզը: Կարբոնային անհիդրազի ինհիբիտորները նաև բարելավում են լեռնային քրոնիկ հիվանդությունը:

Մարդու մարմնի կառուցվածքի մասին առաջին դպրոցական դասերը ներկայացնում են արյան հիմնական «բնակիչներին՝ կարմիր գնդիկներին՝ էրիթրոցիտներին (Er, RBC), որոնք որոշում են գույնը՝ շնորհիվ իրենց պարունակության, և սպիտակ բջիջների (լեյկոցիտների), առկայության։ որոնցից տեսանելի չէ աչքը, քանի որ դրանք գունավոր են, չեն ազդում:

Մարդու կարմիր արյան բջիջները, ի տարբերություն կենդանիների, չունեն միջուկ, բայց մինչ այն կորցնելը, նրանք պետք է գնան էրիթրոբլաստային բջջից, որտեղ նոր է սկսվում հեմոգլոբինի սինթեզը, հասնելու վերջին միջուկային փուլին, որը կուտակում է հեմոգլոբինը և վերածվի հասուն միջուկազերծ բջիջ, որի հիմնական բաղադրիչը արյան կարմիր պիգմենտն է։

Այն, ինչ մարդիկ չեն արել արյան կարմիր բջիջների հետ, ուսումնասիրելով դրանց հատկությունները. նրանք փորձել են դրանք փաթաթել երկրագնդով մեկ (4 անգամ) և դրանք դնել մետաղադրամների սյուների մեջ (52 հազար կիլոմետր) և համեմատել արյան կարմիր բջիջների տարածքը: մարդու մարմնի մակերեսը (արյան կարմիր բջիջները գերազանցեցին բոլոր սպասելիքները, պարզվեց, որ դրանց մակերեսը 1,5 հազար անգամ ավելի է):

Այս յուրահատուկ բջիջները...

Կարմիր արյան բջիջների մեկ այլ կարևոր հատկանիշը նրանց երկգոգավոր ձևն է, բայց եթե դրանք գնդաձև լինեին, ապա դրանց ընդհանուր մակերեսը 20%-ով փոքր կլիներ իրականից: Այնուամենայնիվ, կարմիր արյան բջիջների ունակությունները ոչ միայն դրանց ընդհանուր տարածքի չափն են: Երկգոգավոր սկավառակի ձևի շնորհիվ.

1. Արյան կարմիր բջիջները կարող են ավելի շատ թթվածին և ածխածնի երկօքսիդ տեղափոխել;
2. Ցույց տվեք պլաստիկություն և ազատորեն անցեք նեղ բացվածքներով և կոր մազանոթ անոթներով, այսինքն՝ արյան հոսքի երիտասարդ, լիարժեք բջիջների համար գործնականում խոչընդոտներ չկան: Մարմնի ամենահեռավոր անկյունները ներթափանցելու ունակությունը կորցնում է կարմիր արյան բջիջների տարիքի հետ, ինչպես նաև դրանց ախտաբանական վիճակներում, երբ փոխվում են դրանց ձևն ու չափը: Օրինակ, սֆերոցիտները, մանգաղաձև, կշիռները և տանձերը (պոիկիլոցիտոզ) չունեն այդքան բարձր պլաստիկություն, մակրոցիտները և առավել ևս մեգալոցիտները (անիսոցիտոզ), չեն կարող ներթափանցել նեղ մազանոթների մեջ, հետևաբար ձևափոխված բջիջներն այնքան էլ անթերի չեն կատարում իրենց առաջադրանքները: .

Էր-ի քիմիական բաղադրությունը հիմնականում ներկայացված է ջրով (60%) և չոր մնացորդով (40%), որոնցում. 90-95%-ը զբաղեցնում է արյան կարմիր պիգմենտը,իսկ մնացած 5-10%-ը բաշխվում է լիպիդների (խոլեստերին, լեցիտին, ցեֆալին), սպիտակուցների, ածխաջրերի, աղերի (կալիում, նատրիում, պղինձ, երկաթ, ցինկ) և, իհարկե, ֆերմենտների (ածխաթթվային անհիդրազ, խոլինէսթերազ, գլիկոլիտիկ և այլն) միջև։ .).

Բջջային կառուցվածքները, որոնք մենք սովոր ենք նկատել այլ բջիջներում (միջուկներ, քրոմոսոմներ, վակուոլներ), որպես անհարկի բացակայում են Էր-ում։ Արյան կարմիր բջիջները ապրում են մինչև 3 - 3,5 ամիս, այնուհետև նրանք ծերանում են և, էրիթրոֆոետիկ գործոնների օգնությամբ, որոնք ազատվում են բջիջի ոչնչացման ժամանակ, հրաման են տալիս, որ ժամանակն է դրանք փոխարինել նորերով՝ երիտասարդ և առողջ:

Էրիտրոցիտը առաջանում է իր նախորդներից, որոնք, իրենց հերթին, առաջանում են ցողունային բջիջից։ Եթե ​​մարմնում ամեն ինչ նորմալ է, կարմիր արյան բջիջները վերարտադրվում են հարթ ոսկորների ոսկրածուծում (գանգի, ողնաշարի, կրծքավանդակի, կողերի, կոնքի ոսկորների): Այն դեպքերում, երբ, ինչ-ինչ պատճառներով, ոսկրածուծը չի կարող արտադրել դրանք (ուռուցքի վնաս), արյան կարմիր բջիջները «հիշում են», որ այլ օրգաններ (լյարդ, թիմուս, փայծաղ) ներգրավված են եղել ներարգանդային զարգացման ընթացքում և ստիպում են մարմնին սկսել էրիթրոֆոեզը: մոռացված վայրեր.

Քանի՞սը պետք է լինի սովորաբար:

Ընդհանուր առմամբ մարմնում պարունակվող կարմիր արյան բջիջների քանակը և արյան շրջանառության միջով անցնող կարմիր բջիջների կոնցենտրացիան տարբեր հասկացություններ են: Ընդհանուր թիվը ներառում է այն բջիջները, որոնք դեռ դուրս չեն եկել ոսկրածուծից, անկանխատեսելի հանգամանքների դեպքում մտել են պահեստ կամ նավարկել են իրենց անմիջական պարտականությունները կատարելու համար։ Արյան կարմիր բջիջների բոլոր երեք պոպուլյացիաների ամբողջությունը կոչվում է. erythron. Էրիտրոնը պարունակում է 25 x 10 12 / լ (Տեռա / լիտր) մինչև 30 x 10 12 / լ կարմիր արյան բջիջներ:

Մեծահասակների արյան մեջ կարմիր արյան բջիջների նորմը տարբերվում է ըստ սեռի, իսկ երեխաների մոտ՝ կախված տարիքից։ Այսպիսով.

• Կանանց համար նորմը տատանվում է համապատասխանաբար 3,8 - 4,5 x 10 12 / լ, նրանք նույնպես ունեն ավելի քիչ հեմոգլոբին;
• Այն, ինչ նորմալ ցուցանիշ է կնոջ համար, կոչվում է տղամարդկանց մոտ մեղմ անեմիա, քանի որ կարմիր արյան բջիջների նորմայի ստորին և վերին սահմանները նկատելիորեն ավելի բարձր են՝ 4,4 x 5,0 x 10 12 / լ (նույնը վերաբերում է հեմոգլոբինին);
• Մինչև մեկ տարեկան երեխաների մոտ կարմիր արյան բջիջների կոնցենտրացիան անընդհատ փոխվում է, ուստի յուրաքանչյուր ամսվա համար (նորածինների համար՝ ամեն օր) կա իր նորմը։ Եվ եթե հանկարծ արյան ստուգման ժամանակ երկու շաբաթական երեխայի կարմիր արյան բջիջները հասցվեն մինչև 6,6 x 10 12 / լ, ապա դա չի կարող համարվել որպես պաթոլոգիա, պարզապես սա նորմ է նորածինների համար (4,0 - 6,6 x 10 12 / լ):
• Որոշ տատանումներ նկատվում են կյանքի մեկ տարուց հետո, սակայն նորմալ արժեքները շատ չեն տարբերվում մեծահասակների արժեքներից: 12-13 տարեկան դեռահասների մոտ կարմիր արյան բջիջներում հեմոգլոբինի պարունակությունը և արյան կարմիր բջիջների մակարդակը համապատասխանում են մեծահասակների նորմերին:

Արյան մեջ կարմիր արյան բջիջների ավելացված քանակությունը կոչվում է էրիթրոցիտոզ, որը կարող է լինել բացարձակ (ճշմարիտ) և վերաբաշխիչ։ Վերաբաշխիչ էրիթրոցիտոզը պաթոլոգիա չէ և առաջանում է, երբ Արյան կարմիր բջիջները բարձրանում են որոշակի հանգամանքներում.

1. Մնալ լեռնային վայրերում;
2. Ակտիվ ֆիզիկական աշխատանք և սպորտ;
3. Հոգե-հուզական գրգռվածություն;
4. Ջրազրկում (մարմնից հեղուկի կորուստ փորլուծության, փսխման և այլնի պատճառով):

Արյան մեջ կարմիր արյան բջիջների բարձր մակարդակը պաթոլոգիայի և իսկական էրիթրոցիտոզի նշան է, եթե դրանք արյան կարմիր բջիջների ձևավորման ավելացման արդյունք են՝ առաջացած պրեկուրսոր բջջի անսահմանափակ տարածման (վերարտադրության) և դրա տարբերակման կարմիր արյան բջիջների հասուն ձևերի: ().

Արյան կարմիր բջիջների կոնցենտրացիայի նվազումը կոչվում է էրիտրոպենիա. Այն դիտվում է արյան կորստով, էրիթրոպոեզի արգելակմամբ, արյան կարմիր գնդիկների քայքայմամբ () անբարենպաստ գործոնների ազդեցության տակ։ Արյան կարմիր բջիջների ցածր մակարդակը և արյան կարմիր բջիջների Hb-ի ցածր մակարդակը նշան են:

Ի՞նչ է նշանակում հապավումը:

Ժամանակակից արյունաբանական անալիզատորները, բացի հեմոգլոբինից (HGB), կարմիր արյան բջիջների ցածր կամ բարձր մակարդակից (RBC), (HCT) և այլ սովորական թեստերից, կարող են հաշվարկել այլ ցուցանիշներ, որոնք նշանակված են լատիներեն հապավումով և բացարձակապես պարզ չեն: ընթերցողին.

Բացի կարմիր արյան բջիջների թվարկված բոլոր առավելություններից, ես կցանկանայի նշել ևս մեկ բան.

Արյան կարմիր բջիջները համարվում են հայելի, որն արտացոլում է բազմաթիվ օրգանների վիճակը: Մի տեսակ ցուցանիշ, որը կարող է «զգալ» խնդիրները կամ թույլ է տալիս վերահսկել պաթոլոգիական գործընթացի ընթացքը:

Մեծ նավի համար՝ երկար ճանապարհորդություն

Ինչու՞ են կարմիր արյան բջիջները այդքան կարևոր բազմաթիվ պաթոլոգիական պայմանների ախտորոշման համար: Նրանց առանձնահատուկ դերն առաջանում և ձևավորվում է իրենց յուրահատուկ հնարավորությունների շնորհիվ, և որպեսզի ընթերցողը պատկերացնի արյան կարմիր բջիջների իրական նշանակությունը, կփորձենք թվարկել նրանց պարտականությունները օրգանիզմում։

Իսկապես, Արյան կարմիր բջիջների ֆունկցիոնալ խնդիրները լայն են և բազմազան.

1. Նրանք թթվածինը տեղափոխում են հյուսվածքներ (հեմոգլոբինի մասնակցությամբ)։
2. Նրանք փոխանցում են ածխաթթու գազ (ի լրումն հեմոգլոբինի, ածխածնի անհիդրազ ֆերմենտի և Cl-/HCO 3 իոնափոխանակիչի մասնակցությամբ)։
3. Նրանք կատարում են պաշտպանիչ գործառույթ, քանի որ կարողանում են կլանել վնասակար նյութեր և փոխանցել հակամարմիններ (իմունոգոլոբուլիններ), կոմպլեմենտար համակարգի բաղադրիչներ, ձևավորվել են իմունային համալիրներ (At-Ag) իրենց մակերեսին, ինչպես նաև սինթեզել հակաբակտերիալ նյութ, որը կոչվում է. էրիթրին.
4. Մասնակցել ջր-աղ հավասարակշռության փոխանակմանը և կարգավորմանը:
5. Ապահովել հյուսվածքների սնուցում (էրիթրոցիտները ներծծում և տեղափոխում են ամինաթթուները):
6. Մասնակցել մարմնում տեղեկատվական կապերի պահպանմանը մակրոմոլեկուլների փոխանցման միջոցով, որոնք ապահովում են այդ կապերը (ստեղծագործական գործառույթ):
7. Դրանք պարունակում են թրոմբոպլաստին, որն ազատվում է բջիջից, երբ կարմիր արյան բջիջները ոչնչացվում են, ինչը ազդանշան է կոագուլյացիայի համակարգի համար՝ սկսելու հիպերկոագուլյացիա և ձևավորում: Բացի թրոմբոպլաստինից, կարմիր արյան բջիջները կրում են հեպարին, որը կանխում է թրոմբի առաջացումը: Այսպիսով, ակնհայտ է կարմիր արյան բջիջների ակտիվ մասնակցությունը արյան մակարդման գործընթացին։
8. Արյան կարմիր բջիջները ունակ են ճնշելու բարձր իմունոռեակտիվությունը (գործում են որպես ճնշողներ), որոնք կարող են օգտագործվել տարբեր ուռուցքային և աուտոիմուն հիվանդությունների բուժման համար։
9. Նրանք մասնակցում են նոր բջիջների արտադրության կարգավորմանը (erythropoiesis)՝ ազատելով erythropoietic գործոնները ոչնչացված հին կարմիր արյան բջիջներից։

Արյան կարմիր բջիջները ոչնչացվում են հիմնականում լյարդում և փայծաղում՝ քայքայման արտադրանքի (երկաթի) ձևավորմամբ։ Ի դեպ, եթե յուրաքանչյուր բջիջ դիտարկենք առանձին, ապա այն կլինի ոչ այնքան կարմիր, այլ ավելի շուտ դեղնակարմիր։ Կուտակվելով միլիոնավոր հսկայական զանգվածների մեջ՝ դրանք, իրենց մեջ պարունակվող հեմոգլոբինի շնորհիվ, դառնում են այնպիսին, ինչպիսին մենք սովոր ենք տեսնել դրանք՝ հարուստ կարմիր գույն:

Տեսանյութ. Դաս կարմիր արյան բջիջների և արյան գործառույթների մասին

Ի Կարբոնային անհիդրազ (հոմանիշ՝ կարբոնատդեհիդրատազ, կարբոնատ հիդրոլիզա)

ֆերմենտ, որը կատալիզացնում է ածխածնի երկօքսիդի հետադարձելի խոնավացման ռեակցիան՝ CO 2 + H 2 O ⇔ H 2 CO 3 ⇔ H + + HCO 3: Պարունակվում է արյան կարմիր բջիջներում, ստամոքսի լորձաթաղանթի բջիջներում, մակերիկամի կեղևում, երիկամներում և փոքր քանակությամբ՝ կենտրոնական նյարդային համակարգում, ենթաստամոքսային գեղձի և այլ օրգաններում։ Թթվի դերը մարմնում կապված է թթու-բազային հավասարակշռության պահպանման հետ (թթու-բազային հավասարակշռություն) , CO 2-ի տեղափոխում, աղաթթվի ձևավորում ստամոքսի լորձաթաղանթով: Կ–ի ակտիվությունն արյան մեջ սովորաբար բավական կայուն է, սակայն որոշ պաթոլոգիական պայմաններում այն ​​կտրուկ փոխվում է։ Արյան մեջ Կ–ի ակտիվության բարձրացում նկատվում է տարբեր ծագման սակավարյունության, II–III աստիճանի արյան շրջանառության խանգարումների, թոքերի որոշ հիվանդությունների (բրոնխեկտազներ, պնևմոսկլերոզ), ինչպես նաև հղիության ժամանակ։ Արյան մեջ այս ֆերմենտի ակտիվության նվազումը տեղի է ունենում երիկամային ծագման ացիդոզով, հիպերթիրեոզով: Ներանոթային հեմոլիզով Կ.-ի ակտիվությունը հայտնվում է մեզի մեջ, մինչդեռ սովորաբար այն բացակայում է։ Ցանկալի է սրտի և թոքերի վրա վիրաբուժական միջամտությունների ժամանակ վերահսկել Կ.-ի ակտիվությունը արյան մեջ, քանի որ. այն կարող է ծառայել որպես մարմնի հարմարվողական հնարավորությունների ցուցիչ, ինչպես նաև ածխածնի անհիդրազի ինհիբիտորներով թերապիայի ժամանակ՝ հիպոթիազիդ, դիակարբ:

Կ–ի ակտիվությունը որոշելու համար կիրառվում են ճառագայթաբանական, իմունոէլեկտրոֆորետիկ, գունաչափական, տիտրաչափական մեթոդները։ Որոշումը կատարվում է հեպարինով վերցված ամբողջական արյան մեջ կամ հեմոլիզացված կարմիր արյան բջիջներում: Կլինիկական նպատակներով K-ի ակտիվության որոշման առավել ընդունելի գունաչափական մեթոդները (օրինակ՝ Բրինկման մեթոդի փոփոխությունները), որոնք հիմնված են CO 2-ի հիդրացիայի արդյունքում ինկուբացիոն խառնուրդի pH-ը 9.0-ից 6.3 տեղափոխելու համար անհրաժեշտ ժամանակի սահմանման վրա: Ածխածնի երկօքսիդով հագեցած ջուրը խառնվում է ցուցիչ-բուֆերային լուծույթով և որոշակի քանակությամբ արյան շիճուկով (0.02): մլ) կամ հեմոլիզացված էրիթրոցիտների կասեցում: Ֆենոլ կարմիրը օգտագործվում է որպես ցուցիչ։ Երբ ածխաթթվի մոլեկուլները տարանջատվում են, CO 2-ի բոլոր նոր մոլեկուլները ենթարկվում են ֆերմենտային խոնավացման: Համեմատելի արդյունքներ ստանալու համար ռեակցիան միշտ պետք է ընթանա նույն ջերմաստիճանում, առավել հարմար է սառույցի հալման ջերմաստիճանը պահպանել 0°-ում: Վերահսկիչ ռեակցիայի ժամանակը (CO 2-ի խոնավացման ինքնաբուխ ռեակցիա) սովորաբար 110-125 է Հետ. Սովորաբար այս մեթոդով որոշվելիս Կ.-ի ակտիվությունը միջինում հավասար է 2-2,5 պայմանական միավորի, իսկ 1 միլիոն կարմիր արյան բջիջների դեպքում՝ 0,458 ± 0,006 պայմանական միավոր (վերցվում է Կ.-ի ակտիվության միավորը. լինի կատալիզացված ռեակցիայի արագության 2 անգամ ավելացում):

Մատենագիտություն:Լաբորատոր թեստերի կլինիկական գնահատում, խմբ. ԼԱՎ։ Տիցա, պեր. անգլերենից, էջ. 196, Մ., 1986։